反復發(fā)作偏頭痛實驗動物模型的建立及鑒定.pdf

1、目的：制備反應可靠的偏頭痛反復發(fā)作的動物模型，為偏頭痛等血管源性頭痛的發(fā)病機制、治療藥物和手段的研究提供實驗基礎。 方法：體重為2～4kg的短毛貓12只，隨機分為反復刺激組(n=4)、急性刺激組(n=4)、假手術對照組(n=4)三個組。實驗動物以獸用速眠新Ⅱ(846合劑，0.1ml/kg，im)麻醉后，用電鉆鉆開顱骨，暴露SSS，安放并固定不銹鋼套管。假手術對照組不予電刺激，手術后恢復一周，手術后第8天灌注固定，并取腦干及上頸髓

2、；反復刺激組手術后一周，以單刺激脈寬為250μs、電流1.5mA、頻率3Hz的方波電流刺激清醒狀態(tài)下貓SSS區(qū)硬腦膜一周，每天2小時，第8天刺激結束后1小時灌注固定，并取腦干及上頸髓；急性刺激組手術后恢復一周，第8天以同樣方波刺激清醒狀態(tài)下貓SSS區(qū)硬腦膜2小時，休息1小時后灌注固定，并取腦干及上頸髓，應用免疫組化技術，行延髓和上頸髓冰凍切片c-fos蛋白及nNOS染色。 結果：c-fos及nNOS免疫反應陽性神經(jīng)元主要位于延髓

3、三叉神經(jīng)脊束核尾側部淺層和C1、C2后角的Ⅰ、Ⅱ?qū)?。在孤束核和中央導水管周圍X層也有免疫反應陽性神經(jīng)元表達。假手術對照組動物免疫反應陽性神經(jīng)元較少；急性刺激組和反復刺激組免疫反應陽性神經(jīng)元較假手術對照組明顯增多；急性刺激組和反復刺激組免疫反應陽性神經(jīng)元數(shù)無顯著差異。 結論：刺激SSS區(qū)硬腦膜可激活在偏頭痛痛覺中樞傳遞中起重要作用的三叉神經(jīng)二級神經(jīng)元；反復電刺激貓SSS區(qū)硬腦膜是否增加三叉神經(jīng)二級神經(jīng)元的興奮性尚不明確，還有待于進