二十二碳六烯酸(DHA)聯(lián)合順鉑(DDP)在體內(nèi)對(duì)胃癌的促凋亡作用及機(jī)制的探討.pdf

1、二十二碳六烯酸（DHA）是ω-3不飽和脂肪酸家族中的重要成員，是一種對(duì)人體非常重要的多不飽和脂肪酸，對(duì)抗感染、增強(qiáng)免疫力、改善認(rèn)知障礙等方面均具有重要作用，是腦和精子正常生長(zhǎng)發(fā)育不可缺少的組分。
　　近年來的研究表明DHA對(duì)多種惡性腫瘤均具有抑制作用，越來越多的研究者利用細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等方法去探索DHA抗腫瘤的作用。研究表明DHA能選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞，而對(duì)正常細(xì)胞的影響較輕，其作用機(jī)制涉及對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡和分化的誘導(dǎo)，

2、對(duì)環(huán)氧化酶的抑制和脂質(zhì)過氧化的影響，對(duì)抗癌免疫功能的調(diào)節(jié)，對(duì)惡液質(zhì)因子壓制等方面，并有助于增強(qiáng)經(jīng)典抗腫瘤藥物的作用，達(dá)到增強(qiáng)抗癌作用、降低毒性、解決耐藥等目的。腫瘤病人接受DHA復(fù)合物治療后體重增加，癌性惡病質(zhì)得到改善，生存時(shí)間延長(zhǎng)。
　　胃癌在全世界范圍內(nèi)是常見的惡性腫瘤，發(fā)病率逐漸增加，且發(fā)病的年齡范圍正在進(jìn)一步擴(kuò)大，年輕患者越來越多而且青年人胃癌惡性程度高，變化趨勢(shì)復(fù)雜化。手術(shù)是胃癌主要和傳統(tǒng)的治療手段。但是胃癌術(shù)后患者及晚

3、期患者可能面臨著耐藥、營(yíng)養(yǎng)不良、免疫功能障礙等問題。DHA的攝入不僅能改善病人惡液質(zhì)狀態(tài)，還能提高免疫力，協(xié)同化療或放療增強(qiáng)抗腫瘤作用。
　　本研究通過建立荷瘤小鼠模型，觀察DHA聯(lián)合DDP對(duì)胃癌移植瘤及荷瘤小鼠的影響，進(jìn)而觀察對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響及對(duì)CyclinD1及Caspase-3基因表達(dá)的影響，從而探討DHA在胃癌治療中的作用，進(jìn)一步為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。
　　目的：研究DHA與DDP分別對(duì)胃癌裸鼠移植瘤凋亡的影響，進(jìn)

4、一步研究對(duì)CyclinD1、caspase-3的影響，探討其可能的機(jī)制。
　　方法：將28只BALB/c裸鼠腋下接種0.2mL（1×106個(gè)細(xì)胞）人胃腺癌細(xì)胞MGC-803細(xì)胞懸液，建立人胃癌裸鼠移植瘤模型，成瘤后動(dòng)物隨機(jī)平均分成4組：對(duì)照組（腹腔注射生理鹽水，2次/w；生理鹽水灌胃，2g/kg，1次/d）、DHA組（腹腔注射生理鹽水，2次/w；DHA灌胃，2g/kg，1次/d）、DDP組（腹腔注射DDP，3mg/kg，2次/w；

5、生理鹽水灌胃，2g/kg，1次/d）、聯(lián)合組（腹腔注射DDP，3mg/kg，2次/w；DHA灌胃，2g/kg，1次/d），共治療2周。于接種后24天采用頸椎脫臼法處死全部小鼠，將小鼠腋下腫瘤組織取下。每亞組隨機(jī)取5個(gè)移植瘤標(biāo)本，并制成石蠟標(biāo)本，利用TUNEL法檢測(cè)各組標(biāo)本的凋亡情況,并利用RT-PCR檢測(cè)剩余各標(biāo)本中CyclinD1及caspase-3的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：DHA聯(lián)合DDP組凋亡率高于其余三組（P<0.05）,D

6、DP組凋亡率高于DHA組及空白對(duì)照組（P<0.05）,而DHA組凋亡率高于空白對(duì)照組（P<0.05）。DHA聯(lián)合DDP組、DDP組、DHA組中caspase-3的mRNA表達(dá)量高于空白對(duì)照組（P<0.05）；DHA聯(lián)合DDP組caspase-3的mRNA表達(dá)量高于DDP組及DHA組（P<0.05）；DDP組caspase-3的mRNA表達(dá)量與DHA組無(wú)明顯差別（P>0.05）。DHA聯(lián)合DDP組、DDP組、DHA組中CyclinD1mR

7、NA的表達(dá)量均低于空白對(duì)照組（P<0.05）；DHA聯(lián)合DDP組的表達(dá)量低于DDP組及DHA組（P<0.05）；DDP組中CyclinD1的表達(dá)量與DHA組無(wú)明顯差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：DHA與DDP使荷MGC-803細(xì)胞的BALB/c裸鼠細(xì)胞移植瘤模型的凋亡增加。在人胃癌細(xì)胞MGC-803中，DHA聯(lián)合DDP可能通過上調(diào)caspase-3的表達(dá)，下調(diào)CyclinD1的表達(dá)從而增加腫瘤細(xì)胞凋亡。DHA可能對(duì)DDP起化療增