溫脾通絡(luò)開(kāi)竅方對(duì)AD大鼠的認(rèn)知行為及Tau蛋白、Gsk-3β、PP2A影響的研究.pdf

1、目的:觀察溫脾通絡(luò)開(kāi)竅方對(duì)AD大鼠認(rèn)知行為及Tau蛋白異常磷酸化的影響，并探討其可能的機(jī)制。
　　 方法:3月齡SPF級(jí)雄性SD大鼠52只，運(yùn)用腦立體定位技術(shù)向大鼠右側(cè)海馬注射岡田酸制備AD大鼠動(dòng)物模型，造模14天后，采用經(jīng)典的Morris水迷宮進(jìn)行老年性癡呆大鼠模型的篩選，將造模成功大鼠隨機(jī)分為AD模型組，西藥對(duì)照組，溫脾通絡(luò)開(kāi)竅方高、中、低劑量組，另設(shè)假手術(shù)組。于造模后第20天開(kāi)始治療，各治療組給予相應(yīng)的藥物灌胃，模型組及空

2、白組給予等體積的雙蒸水灌胃。治療21天后檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。采用經(jīng)典的Morris水迷宮進(jìn)行認(rèn)知行為學(xué)評(píng)價(jià)，蛋白免疫印跡法檢測(cè)AD大鼠海馬組織Tau蛋白磷酸化總量，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)蛋白質(zhì)磷酸酶2A(PP2A)和糖原合酶激-3β(Gsk-3β)的活性，并觀察溫脾通絡(luò)開(kāi)竅方對(duì)上述指標(biāo)的影響，探討溫脾通絡(luò)開(kāi)竅方抗AD的可能機(jī)制。
　　 結(jié)果:行為學(xué)結(jié)果顯示:溫脾通絡(luò)開(kāi)竅方高、中、低劑量組AD大鼠在Morris水迷宮測(cè)試中，逃避潛伏期均明顯

3、縮短，成功找到平臺(tái)次數(shù)均明顯增加。其中在定位航行試驗(yàn)中模型組平均潛伏期比空白組明顯延長(zhǎng)，有顯著差異（P＜0.01）。西藥對(duì)照組和高、中、低劑量組的平均潛伏期較模型組明顯縮短，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。組間比較發(fā)現(xiàn)高劑量組與西藥組比較有顯著性差異（P＜0.01）。中、高劑量組也有差異（P＜0.01）。在空間探索實(shí)驗(yàn)中，模型組較空白組大鼠成功找到平臺(tái)的次數(shù)明顯下降，有顯著差異(P＜0.01)。中藥各組與模型組相比，差異均具有

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。西藥組與高、中劑量組比較有差異（P＜0.05或P＜0.01），與低劑量組比較無(wú)差異（P＞0.05），高劑量組與中劑量組比(P＜0.05）。并且中藥各組之間存在一定的量效關(guān)系。
　　 蛋白免疫印跡法結(jié)果顯示:溫脾通絡(luò)開(kāi)竅方高、中、低劑量組AD大鼠海馬Tau蛋白磷酸化水平較空白組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05）。其中模型組與空白組比較含量顯著增加（P＜0.01），低量組和西藥組與模型組比

5、較無(wú)差異（P＞0.05），中藥高、中劑量組與模型組比較顯著降低(P＜0.05)，與西藥組比較也有差異（P＜0.01），但兩者之間無(wú)差異（P＞0.05）。高、中、低量組之間存在一定量效關(guān)系。
　　 酶聯(lián)免疫吸附法結(jié)果顯示:模型組Gsk-3β的活性較空白組均有顯著性的提高，兩者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，各中藥組AD大鼠Gsk-3β的表達(dá)均較模型組有所下降，低劑量組和西藥組與模型組比較無(wú)差異（P＞0.05），中藥高、中劑量組與

6、模型組相比有顯著性差異(P＜0.01或P＜0.05)，與西藥組相比，高劑量組Gsk-3β的活性有顯著性差異。
　　 模型組PP2A的活性較空白組均明顯降低，兩者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，各中藥組AD大鼠PP2A的活性均較模型組有所升高，低劑量組和西藥組與模型組比較無(wú)差異（P＞0.05），中藥高、中劑量組與模型組相比有顯著性差異(P＜0.01或P＜0.05)，與西藥組相比，高劑量組Gsk-3β的活性有顯著性差異。