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1、納米金由于其特有的表面效應(yīng)、高催化性能、介電效應(yīng)以及熒光效應(yīng)被廣泛的應(yīng)用于分析化學(xué)。核酸適配體是一種單鏈DNA或RNA序列,具有與目標(biāo)物質(zhì)高度特異性結(jié)合的能力,同時(shí)能吸附到納米金顆粒的表面,將納米金-核酸適配體制成探針可用于很多物質(zhì)和離子的檢測(cè)。本論文主要研究了納米金及核酸適配體的光譜特性及在蛋白檢測(cè)中的應(yīng)用,內(nèi)容包括以下三個(gè)部分:
(1)用改良的Frens法制備納米金,采用紫外-可見分光光度法對(duì)制備的納米金進(jìn)行表征。將腺苷的
2、核酸適配體吸附于納米金表面,在pH=7.4的Tris-HCl緩沖體系下,腺苷與腺苷核酸適配體特異性結(jié)合,使納米金分散于溶液中。在高濃度鹽的環(huán)境下,分散的納米金團(tuán)聚,溶液的顏色由紅色轉(zhuǎn)為藍(lán)色,利用紫外-可見分光光度法測(cè)定λ526及λ705的吸光度比值可以檢測(cè)納米金團(tuán)聚程度,從而間接地檢測(cè)腺苷的含量。
(2)將凝血酶的核酸適配體吸附于納米金表面,使納米金在高濃度鹽的環(huán)境下不發(fā)生團(tuán)聚。當(dāng)溶液中存在凝血酶時(shí),由于凝血酶核酸適配體與凝血
3、酶的特異性結(jié)合,凝血酶核酸適配體脫離納米金表面,不受適配體保護(hù)的納米金分散于溶液中,在高濃度鹽的環(huán)境下,這部分納米金發(fā)生團(tuán)聚。團(tuán)聚與分散的納米金對(duì)熒光素的熒光猝滅作用相差較大,測(cè)定體系中熒光素?zé)晒鈴?qiáng)度的變化,可檢測(cè)納米金團(tuán)聚的程度,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)體系中凝血酶的含量的檢測(cè)。
(3)人IgG的等電點(diǎn)為7.5-7.8,溶液pH值大于7.8,人IgG帶負(fù)電荷,不會(huì)引起溶液中納米金團(tuán)聚;pH值小于7.5,人IgG帶正電,可以引起納米金團(tuán)聚。
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