巨噬細胞及白介素1β，8在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達及臨床意義.pdf

1、研究背景:子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis,EMs)是中青年婦女的常見病、多發(fā)病,近年來其發(fā)病率有明顯上升趨勢.它病變廣泛、形態(tài)多樣、極具侵襲性和復(fù)發(fā)性,是難治之癥.它的發(fā)病機制眾說紛紜,但仍以經(jīng)血逆流種植學(xué)說為主導(dǎo)理論,而"在位內(nèi)膜決定論"觀點也正引起眾多學(xué)者重視.子宮內(nèi)膜細胞必須突破腹腔液、巨噬細胞、腹膜細胞外基質(zhì)"三道防線",才能完成"粘附-侵襲-血管形成"的"三步曲".近年來,子宮內(nèi)膜異位癥的免疫機制正日益受到關(guān)注.

2、 巨噬細胞是一種多功能的免疫細胞,其數(shù)量和功能異?？赡苁亲訉m內(nèi)膜異位癥發(fā)病的重要原因之一.Khaleque等研究檢測子宮內(nèi)膜異位癥患者在位和異位子宮內(nèi)膜以及異位內(nèi)膜臨近腹膜組織中巨噬細胞浸潤數(shù)量,并與正常子宮內(nèi)膜作對照,結(jié)果顯示子宮內(nèi)膜異位癥患者的在位內(nèi)膜巨噬細胞數(shù)量比對照組顯著增加, Ⅰ、Ⅱ期患者尤為明顯.在位內(nèi)膜巨噬細胞含量隨著月經(jīng)周期逐漸增加,分泌期顯著高于增生期.巨噬細胞具有吞噬、代謝、產(chǎn)生細胞因子及抗腫瘤免疫等多種功能,

3、在宿主防御機制及維持機體內(nèi)環(huán)境平衡方面有重要作用.有研究顯示巨噬細胞的數(shù)量和功能異常是子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病的核心環(huán)節(jié).子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔液及在位、異位內(nèi)膜巨噬細胞含量增多,抗原遞呈能力以及吞噬能力減弱,分泌功能增強,活化巨噬細胞分泌的細胞因子又起到了推波助瀾的作用,而巨噬細胞的產(chǎn)物對自身又有趨化和激活作用,從而引起"瀑布效應(yīng)". 巨噬細胞通過分泌多種活性因子作用于多種靶細胞,彼此間相互促進或拮抗,形成復(fù)雜的細胞一細胞因子網(wǎng)絡(luò),

4、誘導(dǎo)腹腔內(nèi)炎癥的發(fā)生,改變腹腔微環(huán)境,促進異位內(nèi)膜細胞增殖、浸潤、生長及血管生成,參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展.白介素是巨噬細胞的重要分泌產(chǎn)物.有研究證實子宮內(nèi)膜異位癥腹腔液中IL-1,-6,-8,-10的濃度明顯高于正常對照組,活化的巨噬細胞正是其重要來源.其中IL-1靶細胞種類繁多,在細胞因子網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮多種生物學(xué)功能如免疫調(diào)節(jié)、刺激血管生成、防御作用及急性期炎癥反應(yīng)等.IL-lβ蛋白水平在子宮內(nèi)膜異位癥患者的異位內(nèi)膜、腹腔液中均顯著

5、升高.除了其本身引發(fā)的免疫炎癥反應(yīng)參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生外,IL-l β還可通過誘導(dǎo)其他的細胞因子,如整合素、基質(zhì)金屬蛋白酶3,4、白細胞介素8、腫瘤壞死因子和血管內(nèi)皮生長因子等,促進異位內(nèi)膜細胞的黏附、侵襲和新生血管的形成,因而在子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用.IL一8對子宮內(nèi)膜異位癥盆腔內(nèi)炎癥、粘連產(chǎn)生及異位病灶中新生血管的生成進而病灶種植、生長均有重要作用. 但迄今為止,國內(nèi)外文獻僅限于子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔液中

6、IL一1 B和IL-8表達的研究,尚未見對子宮內(nèi)膜異位癥患者在位、異位內(nèi)膜組織局部巨噬細胞胞內(nèi)特異抗體CD68、巨噬細胞分泌產(chǎn)物IL-lβ,-8的表達及其相關(guān)性的研究.研究目的本課題擬在蛋白水平檢測巨噬細胞(CD68)在子宮內(nèi)膜異位癥組織局部表達及其與臨床分期的關(guān)系,并進一步探討CD68與巨噬細胞分泌的細胞因子IL-l β、 IL-8之間的相關(guān)性,旨在明確巨噬細胞在異位子宮內(nèi)膜局部的表達及其功能改變. 材料和方法:40例卵巢子宮

7、內(nèi)膜異位囊腫以及同一患者在位內(nèi)膜標本來自2003-2006年浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院及溫嶺市第一人民醫(yī)院手術(shù)切除的存檔蠟塊;20例因子宮肌瘤等婦科手術(shù)患者在位內(nèi)膜標本來自同時期溫嶺市第一人民醫(yī)院手術(shù)切除的存檔蠟塊進行正常對照.組織均經(jīng)10﹪甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋,厚4um連續(xù)切片,分別作HE染色和免疫組織化學(xué)染色,采用免疫組織化學(xué)二步法,在蛋白水平測定CD68,IL-1 β,IL-8在非子宮內(nèi)膜異位癥患者子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜異位癥患者

8、在位及異位內(nèi)膜中的表達及半定量,以卵巢子宮內(nèi)膜異位囊壁內(nèi)膜和在位子宮內(nèi)膜進行比較,分析其與子宮內(nèi)膜異位癥臨床分期的關(guān)系,并探討CD68與IL-1 β,IL-8之間的相關(guān)性.所有數(shù)據(jù)均采用SPSSl3.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析. 結(jié)果: (1)CD68表達于子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞,子宮內(nèi)膜異位癥患者在位子宮內(nèi)膜陽性率顯著高于對照組子宮內(nèi)膜(P<0.05);子宮內(nèi)膜異位癥患者異位子宮內(nèi)膜陽性率顯著高于在位子宮內(nèi)膜(P<0.01);

9、重度子宮內(nèi)膜異位癥患者異位子宮內(nèi)膜陽性率顯著高于輕度患者(P<0.01); (2)IL-1 β表達于所有子宮內(nèi)膜間質(zhì)和腺體細胞,子宮內(nèi)膜異位癥患者異位子宮內(nèi)膜表達強于在位子宮內(nèi)膜(P<0.001):子宮內(nèi)膜異位癥患者在位子宮內(nèi)膜表達強于對照組子宮內(nèi)膜(P<0.01); (3)IL-8表達于所有子宮內(nèi)膜間質(zhì)和腺體細胞,子宮內(nèi)膜異位癥患者異位子宮內(nèi)膜表達強于在位子宮內(nèi)膜(P<0.01);子宮內(nèi)膜異位癥患者在位子宮內(nèi)膜表達與對

10、照組子宮內(nèi)膜比較無顯著性差異(P>0.05); (4)子宮內(nèi)膜異位癥患者的在位和異位子宮內(nèi)膜中CD68與IL-1 β、IL-8的表達均呈正相關(guān)性(P<0.05),在對照組子宮內(nèi)膜中的表達無相關(guān)性(P=0.607); (5)子宮內(nèi)膜異位癥患者的在位和異位子宮內(nèi)膜中IL-1 β與IL-8表達呈正相關(guān)性(P<0.01),在對照組子宮內(nèi)膜中的表達無相關(guān)性(P:0.552). 結(jié)論: (1)巨噬細胞在非子宮內(nèi)膜異位

11、癥患者子宮內(nèi)膜、輕度及重度子宮內(nèi)膜異位癥患者在位、異位子宮內(nèi)膜細胞中均有表達,子宮內(nèi)膜異位癥患者的在位、異位子宮內(nèi)膜中活化巨噬細胞數(shù)量較對照組升高,并隨疾病嚴重程度顯著上調(diào),提示子宮內(nèi)膜局部組織內(nèi)活化巨噬細胞數(shù)量可能與子宮內(nèi)膜異位癥病灶的發(fā)生有關(guān),并與疾病期別有關(guān). (2)子宮內(nèi)膜異位癥患者異位內(nèi)膜組織巨噬細胞釋放的細胞因子IL-1β,IL-8表達強度較在位子宮內(nèi)膜及對照組子宮內(nèi)膜顯著增強,并與組織局部活化巨噬細胞含量成正相關(guān)性