含表面活性劑的聚丙烯酰胺凝膠電泳及其在腎臟病人血清蛋白分析中的應(yīng)用.pdf

1、本文在聚丙烯酰胺凝膠中加入非離子型表面活性劑，利用親水疏水性能不同的蛋白質(zhì)與表面活性劑的結(jié)合能力不同、因而電泳遷移率也不同的特點，建立一種新的分離蛋白的電泳方法?？疾炝吮砻婊钚詣┑姆N類和濃度、血清進樣量等因素對蛋白分離效果的影響。用含聚乙二醇辛基苯基醚（OP）的聚丙烯酰胺凝膠電泳分離腎臟病人和健康人的血清樣品，比較分離出的蛋白質(zhì)條帶，發(fā)現(xiàn)腎臟病人的一條蛋白質(zhì)條帶染色很深，而健康人的相應(yīng)蛋白質(zhì)條帶染色較淺。在不含OP的聚丙烯酰胺凝膠電泳中

2、，這條蛋白條帶的染色差別較小。將這條蛋白條帶從膠上切下，用TPCK-Trypsin進行膠內(nèi)酶解，將所得肽段通過液相色譜-電噴霧離子阱質(zhì)譜分析肽譜及各肽段的氨基酸序列。根據(jù)肽譜和序列信息，經(jīng)數(shù)據(jù)庫檢索，對特異性的蛋白質(zhì)進行了鑒定。確定腎臟病人的染色較深的電泳條帶中的蛋白為α1-酸性糖蛋白的蛋白部分，而健康人的相應(yīng)蛋白條帶中除有α1-酸性糖蛋白的蛋白部分外，還有補體蛋白及脂蛋白等疏水性蛋白。由此可知，α1-酸性糖蛋白在腎臟病患者血清中的含量