針刺結(jié)合運動訓練對腦梗死大鼠學習記憶功能和患側(cè)海馬CA3區(qū)Map-2、P38表達的影響.pdf

1、目的:通過觀察針刺結(jié)合運動訓練對神經(jīng)運動功能、學習記憶能力、微管相關(guān)蛋白(MAP-2)、突觸素(P38)表達變化的影響，探討針刺結(jié)合運動訓練對腦梗死大鼠學習記憶能力、中樞神經(jīng)系統(tǒng)樹突和突觸的可塑性影響及其可能機制。 方法:(1)參照小泉線栓法建立Wistar大鼠右側(cè)大腦中動脈腦梗死(MCAO)模型。 (2)將80只WistarMCAO大鼠隨機分成4組:假手術(shù)組8例，模型組24例，運動訓練組24例，針刺運動訓練組24例。模型組、運

2、動訓練組和針刺運動訓練組每組各分三個時段進行觀察，分別為手術(shù)后1周、3周、5周，每時段各為8只。(3)動物清醒后進行模型成功評價。均單獨小鼠籠飼養(yǎng)，運動訓練組大鼠于手術(shù)后第五天開始每天進行滾筒式網(wǎng)狀訓練、轉(zhuǎn)棒訓練、平衡棒訓練及網(wǎng)屏訓練。針刺運動訓練組大鼠除運動訓練外(同運動訓練組)于模型成功評價后進行頭穴針刺治療。(4)假手術(shù)組于手術(shù)前后分別進行1次神經(jīng)功能和運動能力測評，模型組、運動訓練組和針刺運動訓練組在術(shù)后各時段進行神經(jīng)功能及運動

3、功能評分，在術(shù)后5周進行學習記憶能力測評。觀察針刺與運動訓練對MCAO大鼠行為學和學習記憶功能恢復的影響。 (5)用MAP-2免疫組織化學實驗試劑盒，SABC法色各組腦梗死患側(cè)海馬CA3區(qū)的MAP-2表達變化特點，探討針刺與運動訓練對樹突可塑性的影響。 (6)用P38免疫組織化學實驗試劑盒，SABC法顯色各組腦梗死患側(cè)海馬CA3區(qū)的P38表達變化特點，探討針刺與運動訓練對突觸可塑性的影響。(7)用圖像分析技術(shù)對各組免疫組化實驗結(jié)果進行定

4、位、定性、定量統(tǒng)計。(8)用SPSS11.5 for windows對統(tǒng)計結(jié)果進行統(tǒng)計學分析。 結(jié)果:(1)假手術(shù)組術(shù)后的神經(jīng)功能和運動能力評分與手術(shù)前無差異。模型組、運動訓練組和針刺運動訓練組術(shù)后神經(jīng)功能和運動功能較手術(shù)前和假手術(shù)組均出現(xiàn)明顯變化。針刺運動訓練組神經(jīng)功能評分優(yōu)于模型組和運動訓練組，與模型組比較在術(shù)后1周時差異有極顯著性(P<0.01)，術(shù)后3周、5周時差異有顯著性(P<0.05)；與運動訓練組比較術(shù)后1周、3周

5、比較差異有顯著性(P<0.05)，術(shù)后5周時比較無顯著性差異。針刺運動訓練組運動能力評分優(yōu)于模型組和運動訓練組，與模型組比較在術(shù)后1周、3周時差異有極顯著性(P<0.01)，術(shù)后5周時平衡木步行和網(wǎng)屏實驗比較差異有顯著性(P<0.05)，而轉(zhuǎn)棒步行訓練差異仍有極顯著性(P<0.01)；與運動訓練組比較在術(shù)后1周、差異有顯著性(P<0.05)，術(shù)后3周時轉(zhuǎn)棒步行訓練差異有顯著性(P<0.05)，其余比較無顯著性差異。(2)相應(yīng)認知功能檢測

6、針刺運動訓練組Y-型迷宮分辨學習能力優(yōu)于運動訓練組，差異有顯著性(P<0.05)；和模型組比較，差異有極顯著性(P<0.01)。(3)假手術(shù)組MAP-2陽性纖維排列整齊，分布密集。梗死后梗死灶中心區(qū)無MAP-2陽性染色，邊緣區(qū)僅見少量陽性短樹突纖維。患側(cè)海馬CA3區(qū)陽性神經(jīng)元及樹突纖維減少，光密度值于術(shù)后l周最低，后逐漸增高，至術(shù)后5周時仍低于正常對照組。術(shù)后1周模型組、運動訓練組MAP-2陽性纖維明顯減少，針刺運動訓練組MAP-2陽性

7、纖維稍有增多，和模型組、運動訓練組比較差異均有極顯著性(P<0.01):在術(shù)后3周、5周時MAP-2陽性表達較模型組明顯增多，與運動訓練組比較差異有顯著性(P<0.05)，和模型組比較差異有極顯著性(P<0.01)。(4)假手術(shù)對照組海馬CA3區(qū)可見突觸素免疫陽性產(chǎn)物呈點狀、小團塊狀彌漫分布，突觸素陽性物在神經(jīng)細胞表面排列成環(huán)狀或半弧形，胞漿中僅有較弱的反應(yīng)，在神經(jīng)纖維間排列呈大小不一、不規(guī)則團塊狀，少數(shù)沿神經(jīng)纖維兩側(cè)排列呈線狀。梗死后

8、梗死灶中心區(qū)無明顯陽性染色，患側(cè)海馬CA3區(qū)突觸素染色陽性纖維從缺血第7天開始逐漸增多。針刺運動訓練組在術(shù)后1周P38光密度稍有增強，和模型組、運動訓練組比較差異均有顯著性(P<0.01)；在術(shù)后3周P38光密度明顯增強，與運動訓練組比較差異有顯著性(P<0.05)，和模型組比較差異有極顯著性(P<0.01)。在術(shù)后5周在術(shù)后與運動訓練組比較差異無顯著性，和模型組比較差異有顯著性(P<0.05)。 結(jié)論:(1)腦缺血損傷后患側(cè)海