山橿化學(xué)成分及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、山橿(三indera reflexa Hemsl)為樟科(Lauraceae)山胡椒屬植物，其根可祛風(fēng)理氣、止血，治療胃痛<'[1，2]>。在河南省民間用于治療慢性胃炎，胃潰瘍等取得了確切的臨床療效。由于其確切的臨床療效和豐富的資源，被收入《河南省地方藥材標(biāo)準(zhǔn)》；山檀根為羚銳制藥廠“胃痛寧片”的主要原料，主治胃脘脹滿，胃寒疼痛，噯氣吞酸及消化性潰瘍<'[3]>，已用于臨床10余年，取得了顯著的臨床療效。但國內(nèi)外對(duì)山檀的研究還很少，“胃痛

2、寧片”也只有薄層色譜法的質(zhì)量控制方法，為了明確這一臨床確有療效的制劑的有效成分，建立能確切反映該藥臨床療效的質(zhì)量控制方法，從源頭上控制藥材的質(zhì)量，對(duì)河南省山檀藥材資源建立客觀、整體和多指標(biāo)的綜合評(píng)價(jià)體系，實(shí)現(xiàn)從源頭上控制藥材的質(zhì)量及生藥資源的合理開發(fā)利用，我們從以下幾個(gè)方面對(duì)其進(jìn)行了研究。 第一部分：化學(xué)成分提取分離與結(jié)構(gòu)鑒定。 采用70％乙醇提取，系統(tǒng)溶劑萃取，得石油醚部位、乙醚部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位。

3、將乙醚部位拌樣上硅膠柱，反復(fù)硅膠柱層析及制備薄層層析，正丁醇部位進(jìn)行Diaion HP-20、ToyopearlHW-40、Sephadex LH-20、硅膠等柱層析及制備薄層層析，結(jié)果共分離得到4個(gè)化合物。根據(jù)化合物的理化性質(zhì)及<'1>HNMR、<'13>CNMR、<'1>H-<'1>HCOSY、HSQC、HMBC等波譜分析方法，鑒定了2個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，分別為：銀松素和reflexaeine Ⅰ。 第二部分：山檀的指紋圖譜研究

4、。 一、建立了山檀總黃酮的HPLC指紋圖譜質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。色譜條件：色譜柱：依利特Hypersil ODS2 C18(5μm，4.6mm×250mm)色譜分析柱；流動(dòng)相：甲醇一水，程序性梯度洗脫：0-5min甲醇(50％→65％)；5-15min，甲醇(65％→75％)；15-40min，甲醇(75％→100％)；純甲醇保持5min。檢測(cè)波長：297nm；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min。本實(shí)驗(yàn)建立了山檀藥材總黃酮的HPLC

5、指紋圖譜；并依法測(cè)定了23批山檀藥材；結(jié)果表明：所得的HPLC指紋圖譜相似度除了產(chǎn)于河南省西峽縣的外均在0.85以上，指紋圖譜控制的物質(zhì)群在藥材中得以重現(xiàn)。 二、建立了山檀揮發(fā)油氣相指紋圖譜質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。色譜條件：HP-5(5％)-二苯基聚硅氧烷共聚物，毛細(xì)管柱(320μm×0.25μm，30.0m)；檢測(cè)器：氫焰離子化檢測(cè)器(FID)；檢測(cè)器溫度：240℃；空氣流量：300mL/min；氫氣流量：30mL/min；載氣：氮?dú)猓?/p>

6、載氣流速：1.0mL/min；程序升溫條件：65℃持續(xù)3min；再以3℃/min，65℃→85℃；1℃/min，85℃→90℃；3℃/min，90℃→99℃；0.2℃/min，99℃→100℃，5.0℃/min，100℃→200℃，200℃持續(xù)3min。建立了山檀藥材揮發(fā)油的氣相指紋圖譜；并對(duì)10批山檀藥材進(jìn)行了氣相指紋圖譜分析。結(jié)果表明：所得的．HPLC指紋圖譜相似度除了產(chǎn)于河南省西峽縣的外均在0.85以上，指紋圖譜控制的物質(zhì)群在藥材

7、中得以重現(xiàn)。第三部分：山檀質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究。 我們采用性狀、顯微及TLC法對(duì)不同產(chǎn)地，不同生長年限的山檀藥材進(jìn)行定性鑒別研究；并對(duì)山檀藥材水分、灰分、浸出物、揮發(fā)油等常規(guī)項(xiàng)進(jìn)行了測(cè)定；以化學(xué)成分研究為基礎(chǔ)建立了以山橿總黃酮為控制指標(biāo)的高效液相法指紋圖譜，以揮發(fā)性成分為控制指標(biāo)的毛細(xì)管柱氣相法指紋圖譜。結(jié)合前期對(duì)球松素和銀松素的含量測(cè)定研究基礎(chǔ)，修定了山橿的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 本研究建立了山檀藥材的多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)體系。對(duì)于指導(dǎo)實(shí)際生