人重組IL-24基因治療乳腺癌的實驗研究.pdf

1、目的：(1)構(gòu)建hIL-24原核表達載體pET-21a(+)-IL-24，并在大腸桿菌中進行表達，將獲得的rhIL-24蛋白純化復(fù)性，體外實驗觀察rhIL-24蛋白對乳腺癌細胞(MDA-MB-231細胞)生長抑制效應(yīng)及誘導(dǎo)乳腺癌細胞凋亡的作用；(2)構(gòu)建hIL-24真核表達載體pcDNA3-hIL24,將其轉(zhuǎn)染CHO細胞并進行穩(wěn)定表達，體外檢測CHO細胞表達的rhIL-24蛋白對乳腺癌細胞(MDA-MB-231細胞)的抗腫瘤活性及誘導(dǎo)乳

2、腺癌細胞凋亡的功能；(3)體外觀察rhIL-24蛋白免疫刺激及抑制血管形成的作用，進一步探討rhIL-24蛋白的的生物學(xué)功能；(4)采用原核表達rhIL-24蛋白和pcDNA3-hIL-24真核質(zhì)粒對裸鼠乳腺癌動物模型進行治療研究，觀察和比較兩者治療效果，探討其治療作用機理?！　〗Y(jié)論：(1)本實驗成功構(gòu)建了pET-21a(+)-IL-24原核表達載體，在大腸桿菌中得到了高效表達，獲得了純化復(fù)性的rhIL-24蛋白，證實了rhIL-24

3、蛋白對乳腺癌細胞(MDA-MB-231細胞)具有生長抑制和誘導(dǎo)凋亡的功能。(2)成功構(gòu)建了hIL-24真核重組表達載體pcDNA3-hIL24,經(jīng)轉(zhuǎn)染和篩選后在哺乳類動物細胞CHO細胞中得到了穩(wěn)定表達，同樣證明了其表達產(chǎn)物rhIL-24能抑制MDA-MB-231乳腺癌細胞生長，誘導(dǎo)MDA-MB-231細胞凋亡。(3)rhIL-24蛋白體外能刺激外周血單個核細胞(PMBC)誘生IL-6、IFN-γ和TNF-α的分泌；并能抑制CAM血管的形