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文檔簡介
1、目的:喉癌是耳鼻咽喉-頭頸外科常見的惡性腫瘤之一。喉癌的發(fā)生與其它惡性腫瘤一樣,是由多種基因的表達水平的改變而引起的。伴有Kazal域的富含半胱氨酸的逆轉誘導蛋白(reversion-inducing-cystein-richprotein with kazalmotifs,RECK)基因是近年來新發(fā)現(xiàn)的轉錄抑制基因,可以通過抑制多種MMPs的表達,抑制腫瘤的侵襲及轉移?;|金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinases,
2、MMPs)可以降解細胞外基質,有研究表明,MMP2的表達水平同腫瘤的侵襲和惡性程度密切相關,TIMP-2作為MMP-2的抑制劑,通過多種方式抑制MMP-2的活性。同時RECK受到P21ras等多種癌基因的調控。本研究通過測定RECK、MMP-2、TIMP-2和P21ras在喉癌、癌旁及正常組織中的表達及其相互關系,探討喉癌的發(fā)生及其侵襲轉移。
方法:
1應用免疫組織化學(immunohistochemistr
3、y,IHC)S-P法檢測40例喉癌組織、15例癌旁組織和15例正常喉粘膜中RECK及MMP-2、TIMP-2、P21ras的表達情況。
2應用流式細胞術(Flow Cytometrye,FCM)的方法定量檢測40例喉癌組織、15例癌旁組織和15例正常喉粘膜組織中RECK及MMP-2、TIMP-2的含量。
3運用統(tǒng)計軟件SPSS13.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。以P≤0.05為差異在統(tǒng)計學上有顯著性意義,P≤0.01
4、為差異在統(tǒng)計學上有非常顯著性意義。
結果:
1 RECK蛋白的表達
1.1免疫組化法:應用S-P法檢測喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中RECK的表達強度呈上升趨勢,三組相比有顯著性差異(P<0.01)。進一步兩兩比較,喉癌組織中的RECK表達均低于正常組(P<0.01)與癌旁組(P<0.01),而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P>0.05)。在喉癌組織中,RECK蛋白表達與淋巴結轉移(P<0.0
5、5)、臨床分期(P<0.01)及病理分級(P<0.05)有關,而與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(P>0.05)。
1.2流式細胞術:檢測RECK蛋白在喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中的表達量(FI值)分別為0.8682±1:0.1961、0.9889±0.1785、1.1200±0.1153,三組相比有顯著性差異(P<0.01)。喉癌組織中RECK蛋白的表達量明顯低于癌旁組織(P<0.01)及正常喉粘膜組織(P
6、<0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無顯著性差異(P>0.05)。在喉癌組織中,RECK蛋白表達與淋巴結轉移(P<0.05)、臨床分期(P<0.01)及病理分級(P<0.05)有關。
2 MMP-2蛋白的表達
2.1免疫組化法:應用S-P法檢測喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中MMP-2蛋白的表達強度呈下降趨勢,三組相比有顯著性差異(P<0.01)。進一步兩兩比較,喉癌組MMP-2蛋白的表達高于正常組(P<0
7、.01)與癌旁組(P<0.01),而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P>0.05)。在喉癌組織中,MMP-2蛋白表達與淋巴結轉移(P<0.05)、臨床分期(P<0.01)及病理分級(P<0.01)有關,與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(P>0.05)。
2.2流式細胞術:檢測MMP-2蛋白在喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中的表達量(FI值)分別為2.6088±0.1954、1.0322±0.1577、0.6811
8、±0.1732,相比三組相比有顯著性差異(P<0.01)。喉癌組織中MMP-2蛋白的表達量明顯高于癌旁組織(P<0.01)及正常喉粘膜組織(P<0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無顯著性差異(P>0.05)。在喉癌組織中,MMP-2蛋白表達與淋巴結轉移(P<0.05)、臨床分期(P<0.01)及病理分級(P<0.01)有關。
3 TIMP-2蛋白的表達
3.1免疫組化法:應用S-P法檢測喉癌組織、癌旁組織
9、及正常粘膜中TIMP-2的表達強度呈下降趨勢,三組相比有顯著性差異(P<0.01)。進一步兩兩比較,喉癌組織中的TIMP-2表達均高于正常組(P<0.01)與癌旁組(P<0.01),而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P>0.05)。在喉癌組織中,TIMP-2蛋白表達與淋巴結轉移(P<0.01)、臨床分期(P<0.01)及病理分級(P<0.01)有關,而與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(P>0.05)。
3.2流
10、式細胞術:檢測TIMP-2蛋白在喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中的表達量(FI值)分別為3.6077±0.1966、1.1125±0.1672、0.6080±0.1987,三組相比有顯著性差異(P<0.01)。喉癌組織中TIMP-2蛋白的表達量明顯高于癌旁組織(P<0.01)及正常喉粘膜組織(P<0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無顯著性差異(P>0.05)。在喉癌組織中,TIMP-2蛋白表達與淋巴結轉移(P<0.01)、臨床分期(P
11、<0.01)及病理分級(P<0.01)有關。
4 P21ras蛋白的表達:應用S-P法檢測喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中P21ras的表達強度呈下降趨勢,三組相比有顯著性差異(P<0.01)。進一步兩兩比較,喉癌組織中的P21ras表達均高于正常組(P<0.01)與癌旁組(P<0.01),而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P>0.05)。在喉癌組織中,P21ras蛋白表達與淋巴結轉移(P<0.01)、臨床分期(P<0.05
12、)及病理分級(P<0.01)有關,而與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(P>0.05)。
5 RECK與MMP-2、TIMP-2、P21ras在喉癌組織中的相關性
5.1 RECK與MMP-2的相關性:RECK蛋白表達量(FI值)與MMP-2蛋白表達量(FI值)呈直線負相關,直線回歸方程Y=-2.206X+4.076(r=0.895,P=0.000)。
5.2 RECK與TIMP-2無
13、相關性(r=-0.208,P=-0.198>0.05)。
5.3 RECK與P21ras呈負相關(r=-0.332,P=-0.036<0.05)。
結論:
1 RECK蛋白、MMP-2蛋白、TIMP-2蛋白和P21ras蛋白在喉癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織中均有表達。
2 MMP-2蛋白、TIMP-2蛋白和P21ras蛋白在喉癌組織中的定性表達均明顯高于癌旁組織及正常喉粘膜組織
14、,RECK蛋白在喉癌組織中的定量及定性表達均明顯低于癌旁組織及正常喉粘膜組織,可能與喉癌的發(fā)生有關。
3 RECK蛋白、MMP-2蛋白、TIMP-2蛋白和P21raS蛋白在喉癌組織中的表達與臨床分期、淋巴結轉移、病理分級有相關性;與臨床分型、腫瘤大小、年齡、吸煙量和性別無關。提示四種蛋白可能與喉癌的侵襲與轉移有關。
4 RECK和MMP-2在喉癌組織中的蛋白表達呈直線負相關,RECK與TIMP-2無直線相關性
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