生物可降解聚合物納米藥物載體用于癌癥的靶向聯(lián)合治療.pdf

1、腫瘤化療給患者帶來(lái)的毒副作用引起人們極大的關(guān)注,為了降低化療藥物的毒副作用,提高其生物利用度,近年來(lái)人們大力開(kāi)發(fā)各種藥物載體體系。理想的藥物載體應(yīng)該本身對(duì)生物體有較好的生物相容性,能夠在體內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間循環(huán),到達(dá)腫瘤細(xì)胞后釋放出藥物。所以,藥物釋放技術(shù)成為許多強(qiáng)效抗癌藥物能否成功應(yīng)用于臨床的關(guān)鍵。本論文主要對(duì)兩種納米藥物載體體系進(jìn)行了研究。本研究分為兩個(gè)部分：
　　 第一部分工作主要介紹了偶聯(lián)葉酸、界面交聯(lián)的生物可降解聚合物膠柬體系用

2、于紫杉醇的靶向釋放。我們成功地合成了兩種嵌段聚合物:一種是聚乙二醇-聚碳酸酯-聚丙交酯(PEG-PAC-PLA),可以通過(guò)PAC段來(lái)對(duì)膠束進(jìn)行界面交聯(lián)；另一種是葉酸-聚乙二醇-聚丙交酯(FA-PEG-PLA),可以用來(lái)靶向帶有葉酸受體的癌細(xì)胞如KB細(xì)胞。調(diào)節(jié)二者混合物中FA-PEG-PLA的含量(0-20 wt.％)可以形成較好的聚合物膠束；當(dāng)理論載藥量為10 wt.％時(shí),對(duì)紫杉醇有很高的包封率(70-88％)?？漳z束以及載有紫杉醇的膠

3、束均可以通過(guò)紫外光照射發(fā)生交聯(lián),且交聯(lián)之后聚合物膠束粒徑明顯減小,同時(shí)穩(wěn)定性增強(qiáng)。紫杉醇的體外釋放實(shí)驗(yàn)研究表明了交聯(lián)后的膠束在稀釋的情況下仍然很穩(wěn)定,釋放出很少的紫杉醇。同時(shí)從MTT實(shí)驗(yàn)我們也可以看到,交聯(lián)后的空膠束在有交聯(lián)劑(0.05 wt.％)存在下對(duì)KB細(xì)胞沒(méi)有毒性。隨著聚合物中葉酸含量的增加,包裹紫杉醇的交聯(lián)和未交聯(lián)的聚合物膠束對(duì)KB細(xì)胞的毒性增大。更重要的是,當(dāng)FA-PEG-PLA含量達(dá)到20 wt.％時(shí),在KB細(xì)胞中培養(yǎng)12

4、小時(shí)后的膠束比游離的紫杉醇有更高的毒性(細(xì)胞存活率33％vs.50％)。造成這一結(jié)果的因?yàn)榭赡苁蔷酆衔锬z束通過(guò)葉酸與KB細(xì)胞表面的葉酸受體結(jié)合,增強(qiáng)了細(xì)胞對(duì)膠束的吞噬作用。流式細(xì)胞儀測(cè)試結(jié)果也表明了用FITC標(biāo)記的、表面偶聯(lián)葉酸的交聯(lián)膠束比沒(méi)有偶聯(lián)葉酸的對(duì)照組更多地進(jìn)入KB細(xì)胞。以上結(jié)果顯示了表面偶聯(lián)葉酸的、界面交聯(lián)的生物可降解聚合物膠束在靶向癌癥治療方面有很大的應(yīng)用前景。
　　 第二部分工作主要介紹了具有不對(duì)稱(chēng)膜結(jié)構(gòu)的、生物可

5、降解聚合物囊泡用于水溶性抗癌藥物鹽酸阿霉素(DOX·HCl)和油溶性、抗耐藥性、抗癌藥物姜黃素的包裹和釋放,以用于癌癥的聯(lián)合治療。首先以大分子RAFT試劑PEG-PCL-CPADN為鏈轉(zhuǎn)移劑、偶氮二異丁氰(AIBN)作引發(fā)劑、通過(guò)可逆加成斷裂鏈轉(zhuǎn)移(RAFT)聚合的方法合成了一系列不同分子量的三嵌段聚合物聚乙二醇-聚己內(nèi)酯-聚丙烯酸(PEG-PCL-PAA),其中PEG段的分子量為5 kDa、PCL段的分子量為18 kDa、PAA段的分

6、子量為0.8、3.1和6.1 kDa。利用薄膜水化法可直接在水溶液中通過(guò)自組裝得到聚合物囊泡,動(dòng)態(tài)光散色儀(DLS)測(cè)定其粒徑為120-200 nm(PDI0.09-0.25)；通過(guò)共聚焦激光顯微鏡(CLSM)證實(shí)了其具有聚合物囊泡的結(jié)構(gòu)。通過(guò)對(duì)不同PAA形成聚合物囊泡的表面電位的測(cè)試可判斷,該聚合物囊泡含有不對(duì)稱(chēng)的膜結(jié)構(gòu),較短的PAA段(0.8和3.1 kDa)分布在囊泡膜的內(nèi)表面,較長(zhǎng)的PEG段(5 kDa)則分布在囊泡膜的外表面。

7、利用該聚合物囊泡內(nèi)表面的羧基的靜電吸引作用力可以高效包裹親水性的、含有胺基的DOX·HCl(載藥率高達(dá)12.4 wt.％),同時(shí)可在疏水的囊泡膜內(nèi)包裹疏水性藥物姜黃素(載藥率高達(dá)11.8 wt.％)。從阿霉素的體外釋放結(jié)果可以看到,在模擬細(xì)胞外條件下即pH7.4和生理鹽濃度下,包裹的阿霉素釋放緩慢,而在模擬細(xì)胞內(nèi)內(nèi)涵體、溶酶體的條件下及pH5.0和生理鹽濃度下,包裹的阿霉素釋放速度顯著增強(qiáng),表明在被細(xì)胞內(nèi)吞后,阿霉素能夠被可控地釋放到細(xì)