CDA-Ⅱ?qū)θ四z質(zhì)瘤細(xì)胞增殖抑制和誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、　　目的：探討人尿萃取物CDA-Ⅱ(cell differentiation agent-Ⅱ,細(xì)胞分化劑)對人膠質(zhì)瘤細(xì)胞SWO-38增殖和分化的影響及其可能的作用機(jī)制,為CDA-Ⅱ作為新的誘導(dǎo)分化劑用于膠質(zhì)瘤的治療提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：1、應(yīng)用MTT法、集落形成試驗(yàn)、裸鼠抑瘤實(shí)驗(yàn)觀察CDA-Ⅱ?qū)WO-38細(xì)胞增殖的影響；2、通過光鏡、電鏡觀察和免疫組化鑒定CDA-Ⅱ誘導(dǎo)細(xì)胞分化的作用；3、利用MTT法、Western

2、Blot檢測CDA-Ⅱ聯(lián)合順鉑抗膠質(zhì)瘤生長的協(xié)同作用及其抗瘤的可能機(jī)制。
　　結(jié)果：1、SWO-38經(jīng)1~5g/L CDA-Ⅱ處理3天后,細(xì)胞增殖抑制率為39.49%±5.27%~65.05%±5.89%,CDA-Ⅱ的IC50為2.52g/L；0.3~2.1g/L CDA-Ⅱ處理SWO-38 10天后,集落形成抑制率為23.45%±0.62%~96.22%±1.01%,IC50為1.03g/L。而且這種抑制效應(yīng)呈劑量依賴性。經(jīng)腹腔

3、注射給藥28天后,見高低劑量CDA-Ⅱ均可顯著抑制裸鼠體內(nèi)SWO-38細(xì)胞增殖,移植瘤增殖抑制率為79.94%、42.77%(p<；0.05,n=10)。2、經(jīng)CDA-Ⅱ處理后,光鏡觀察發(fā)現(xiàn)SWO-38細(xì)胞胞體變大,核漿比減小,突起增多,表現(xiàn)出向成熟的星形細(xì)胞分化現(xiàn)象；電鏡觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞表面微絨毛減少,胞漿中線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器增多；免疫組化顯示膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,G

4、FAP)表達(dá)增強(qiáng)。3、CDA-Ⅱ毒性很低,可以顯著增強(qiáng)順鉑對膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的抑制作用,0.5~2g/L CDA-Ⅱ可使順鉑對SWO-38細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度由4.73mg/L分別降低至2.55mg/L、0.60mg/L、0.19mg/L。Western blot顯示CDA-Ⅱ作用后的SWO-38細(xì)胞C-erbB2蛋白表達(dá)降低。
　　結(jié)論：1、CDA-Ⅱ在體內(nèi)外均能有效抑制人膠質(zhì)瘤SWO-38細(xì)胞的惡性增殖,而且抑制效應(yīng)呈劑量依賴性。