2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、蘋果矮化密植栽培是世界蘋果發(fā)展的趨勢,實(shí)現(xiàn)蘋果矮化栽培最主要途徑是利用好矮化砧木及短枝型品種。雖然矮化砧木及短枝型品種在生產(chǎn)中普遍應(yīng)用,但矮化機(jī)理,特別是分子機(jī)理尚未完全揭示。本文分析了長富2號(hào)/M9(矮化砧木)和長富2號(hào)/MM106(半喬化砧木)生長素代謝相關(guān)基因的表達(dá)情況,研究了幾個(gè)關(guān)鍵基因在致矮中的功能和作用。利用miRNA組測序手段,分析了普通型富士長富2號(hào)和短枝芽變煙富6號(hào)中枝條發(fā)育相關(guān)差異miRNA。從生長素和miRNA角度

2、,揭示矮化砧木和短枝型品種的致矮機(jī)理,豐富蘋果矮化調(diào)控理論。取得的主要研究結(jié)果如下:
  1、對(duì)長富2號(hào)/M9和長富2號(hào)/MM106葉片、接穗韌皮部、砧木韌皮部和根系中的生長素含量、生長素合成基因、生長素運(yùn)輸基因和生長素代謝相關(guān)基因進(jìn)行了分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn),長富2號(hào)/M9中生長素的濃度低于長富2號(hào)/MM106。長富2號(hào)/M9砧木韌皮部的生長素濃度高于其接穗。在長富2號(hào)/M9葉片和根系中,生長素合成基因MdYUCCA8和MdYUCCA1

3、0a表達(dá)顯著低于長富2號(hào)/MM106。長富2號(hào)/M9砧木韌皮部和根系中,生長素運(yùn)輸基因MdPIN1b和MdPIN8a顯著低于長富2號(hào)/MM106。長富2號(hào)/M9中的生長素軛合酶基因MdGH3-5b和MdGH3-9a顯著低于長富2號(hào)/MM106。然而,長富2號(hào)/M9中的生長素水解酶基因MdIAR3c和MdILL6c顯著高于長富2號(hào)/MM106。
  2、在M9和MM106中克隆了MdYUCCA8基因,該基因編碼1272bp核苷酸,二

4、者序列相似性99.9%,編碼423個(gè)氨基酸??寺×薓dYUCCA8編碼區(qū)上游1600bp啟動(dòng)子序列,二者相似性為99.6%。MdYUCCA8啟動(dòng)子受到GA、MJ和Br誘導(dǎo),亞精胺和乙烯利顯著抑制了MdYUCCA8啟動(dòng)子活性。高溫促進(jìn)MdYUCCA8的表達(dá),煙草葉片雙熒光素酶瞬時(shí)表達(dá)實(shí)驗(yàn)證明MdPIF4a與MdYUCCA8啟動(dòng)子互作。在擬南芥中異位表達(dá)MdYUCCA8,促進(jìn)了擬南芥植株花莖的生長、頂端優(yōu)勢顯著增加、側(cè)枝減少、角果畸形、促進(jìn)

5、了根系的生長,側(cè)根數(shù)量和側(cè)根長度顯著高于野生型。
  3、在M9和MM106中克隆了MdYUCCA10a基因,該基因編碼1149bp核苷酸,二者序列相似性99.9%,編碼382個(gè)氨基酸。克隆了MdYUCCA10a編碼區(qū)上游1800bp啟動(dòng)子序列,二者相似性為99.7%。MdYUCCA10a啟動(dòng)子受到ABA、Spe誘導(dǎo),乙烯利顯著抑制MdYUCCA10a啟動(dòng)子活性。在擬南芥中異位表達(dá)MdYUCCA10a,促進(jìn)了擬南芥植株花莖的生長,

6、促進(jìn)了根系的生長,主根長度、側(cè)根數(shù)量和側(cè)根長度顯著高于野生型。
  4、在M9和MM106中克隆了MdABCB19基因,其編碼1250個(gè)氨基酸,含有兩個(gè)ABC_membrance結(jié)構(gòu)域,兩個(gè)ABC_tran結(jié)構(gòu)域。該序列在M9和MM106中存在一個(gè)非同義SNP,編碼氨基酸由A突變?yōu)镾,導(dǎo)致M9α螺旋少了一段。MdABCB19在砧木M9和MM106、長富2號(hào)/M9和長富2號(hào)/MM106均差異表達(dá)。啟動(dòng)子序列分析發(fā)現(xiàn)M9的MdABCB

7、19啟動(dòng)子在起始密碼子上游170bp處有“CTCTGT”6個(gè)堿基缺失,導(dǎo)致M9缺失了一個(gè)5'UTR Py-rich stretch motif。MM106MdABCB19的啟動(dòng)子活性高于M9MdABCB19,并且MdABCB19啟動(dòng)子受光照調(diào)控。MdABCB19啟動(dòng)子活性隨著5'UTR Py-rich stretch motif元件數(shù)目的增加而增強(qiáng)。
  5、在長富2號(hào)及短枝型芽變煙富6號(hào)頂梢中,共發(fā)現(xiàn)700個(gè)成熟的miRNA,包

8、括202個(gè)蘋果已知miRNA和498新miRNA。長富2號(hào)和煙富6號(hào)中有135個(gè)差異表達(dá)的miRNA,大多數(shù)差異的已知miRNA在煙富6號(hào)中下調(diào)表達(dá)。煙富6號(hào)枝條頂梢IAA、GA、ZR和ABA含量都低于長富2號(hào)。噴施GA可以促進(jìn)煙富6號(hào)短枝生長,變?yōu)殚L枝。煙富6號(hào)頂梢中細(xì)胞伸長和細(xì)胞分裂相關(guān)基因的表達(dá)水平都顯著低于長富2號(hào)。
  綜上所述,生長素在砧木誘導(dǎo)接穗矮化中起著重要作用,長富2號(hào)/M9中低表達(dá)的生長素合成基因MdYUCCA

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