刺五加、滑菇多糖提取工藝的優(yōu)化與建立.pdf

1、目前市場(chǎng)上的多糖制劑多為單一制劑，如黃芪多糖、香菇多糖、裂褶菌多糖、云芝肝泰等，具有提高免疫力、抗腫瘤等多種功效。近年來(lái)，復(fù)合多糖己成為一個(gè)國(guó)內(nèi)外新的研究熱點(diǎn)，并相繼有類似產(chǎn)品推出，如國(guó)內(nèi)的“無(wú)限極口服液”、“莎克來(lái)復(fù)合多糖膠囊”，源于新西蘭的“甘諾寶力”等。但這些復(fù)合多糖制劑均為真菌復(fù)合多糖制劑，而基于“配伍理論”將植物多糖與真菌多糖的復(fù)合多糖制劑在國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)產(chǎn)品上市。本研究著眼于開(kāi)發(fā)植物與真菌多糖的復(fù)合制劑，對(duì)植物多糖、真菌多糖提取

2、制備過(guò)程中的技術(shù)環(huán)節(jié)進(jìn)行了研究，以期為開(kāi)發(fā)復(fù)合多糖產(chǎn)品提供技術(shù)條件。 關(guān)于植物、真菌多糖提取工藝，目前技術(shù)上還存在一些不足，如多糖提取周期長(zhǎng)、多糖提取率低、多糖產(chǎn)品純度低、雜質(zhì)多等。這些問(wèn)題不僅增加了多糖制品的成本，而且影響了產(chǎn)品質(zhì)量。對(duì)多糖提取工藝的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)進(jìn)行深入研究是克服這些問(wèn)題的唯一途徑。 本研究以藥用植物刺五加，真菌滑菇材料，用單因子篩選和正交實(shí)驗(yàn)分析了多糖水提醇沉工藝中各因素的最佳條件。經(jīng)試驗(yàn)確立的刺五加

3、多糖水提醇沉工藝參數(shù)如下：水提溫度為90℃，提取時(shí)間150 min，水料比18:1，提取次數(shù)2次；醇沉溫度為-20℃，時(shí)間36 h，乙醇與浸提液比例為4:1，pH值7?；蕉嗵撬峁に噮?shù)如下：提取溫度90～100℃，水料體積比為40:1，提取1.5 h，提取次數(shù)1次。 對(duì)多糖提取液去色素、去蛋白的研究結(jié)果如下：通過(guò)比較860021、DM2、330、D941、D202R．等樹(shù)脂，活性炭和H<,2>O<,2>對(duì)刺五加多糖提取液去色

4、素，去蛋白效果，確定了用D941樹(shù)脂動(dòng)態(tài)吸附法不僅可去除刺五加多糖中的色素，而且對(duì)蛋白也有很好的去除作用。該方法對(duì)刺五加多糖提取液脫色率為84.39％，去蛋白率為85.00％，多糖保留率為83.38％。隨后采用此法對(duì)香菇多糖提取液進(jìn)行應(yīng)用，結(jié)果顯示D941樹(shù)脂法在香菇多糖提取液中去色素、蛋白完全可行，可使其脫色率，去蛋白率，多糖保留率分別達(dá)到87.28％，92.34％和68.98％。此方法把多糖去色素和去蛋白合并為一步，縮短了多糖提取的

5、工藝流程，降低了成本，提高了效率。 刺五加多糖提取液經(jīng)D941樹(shù)脂法去色素、蛋白后，采用DEAE-Sepharose F．F陰離子交換層析柱，進(jìn)一步純化。結(jié)果如下：過(guò)DEAE-Sepharose F．F柱后得到了兩個(gè)多糖組分As-1和As-2，對(duì)兩組分進(jìn)行紫外可見(jiàn)光譜檢測(cè)，顯示As-2多糖組分在200 nm～400 nm區(qū)間處沒(méi)有明顯的特征吸收峰，表明刺As-2多糖組分已沒(méi)有蛋白質(zhì)、核酸和其它雜質(zhì)，但As-1在200nm～400

6、 nm區(qū)間處仍有特征吸收峰，對(duì)As-1組分用Sephadex-G200來(lái)進(jìn)一步分離和驗(yàn)證多糖的純度，結(jié)果顯示Sephadex-G200洗脫曲線顯示了一個(gè)對(duì)稱峰，表明洗脫出來(lái)的多糖組分已經(jīng)均一。此外，我們還對(duì)滑菇最適液態(tài)培養(yǎng)菌株進(jìn)行了篩選，研究了不同碳源、氮源對(duì)滑菇菌絲體產(chǎn)量的影響，采用正交設(shè)計(jì)法進(jìn)行滑菇液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基配方篩優(yōu)化。結(jié)果顯示：所篩選的13個(gè)滑菇菌株中C3-3林盛最適合液態(tài)培養(yǎng)；液體發(fā)酵培養(yǎng)基的碳氮源優(yōu)化研究中，所采取的一系列