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文檔簡介
1、目的:糖尿病胃輕癱是糖尿病的常見并發(fā)癥之一,其發(fā)生能夠影響降糖藥物及其他藥物的藥代動(dòng)力學(xué),造成血糖不穩(wěn)定。目前西醫(yī)多采用胃腸動(dòng)力藥治療,但是停藥后易復(fù)發(fā),且長期服用副作用較大。我們根據(jù)其陰虛燥熱血瘀的基本病機(jī),制定涼潤通絡(luò)方,為明確該方劑改善糖尿病胃輕癱的療效及作用機(jī)制,采用鏈脲佐菌素(STZ)注射法制作糖尿病大鼠模型,通過運(yùn)用放免和免疫組化的方法,對(duì)血漿中MOT、SS、CCK進(jìn)行檢測,探討其對(duì)胃腸激素和胃腸內(nèi)分泌細(xì)胞的影響。
2、方法:68口、清潔級(jí)Wistar雄性大鼠,體重180~220g,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、西沙必利治療組、涼潤通絡(luò)方治療組。采用腹腔注射STZ,制作糖尿病模型。模型成功后,不予降糖藥物控制,普通飼料正常喂養(yǎng)12周。第12周末,于各組隨機(jī)抽取2只大鼠,檢測胃排空率及小腸推進(jìn)率,證實(shí)已存在明顯胃輕癱改變。第13周起,分別給予蒸餾水、西沙必利水溶液、涼潤通絡(luò)方灌胃。6周后,停藥,禁食24h后,股動(dòng)脈取血,4℃離心,取血漿,采用放免法檢測
3、血漿中。MOT、SS、CCK的濃度;取胃竇組織、十二指腸組織,免疫組化檢測MOT、SS、CCK內(nèi)分泌細(xì)胞。 結(jié)果:如下所述。 1、與正常對(duì)照組相比,糖尿病各組各時(shí)段血糖明顯增高(P<0.01);兩治療組相比各時(shí)段血糖無明顯變化(P>0.05)。 2、與同期飼養(yǎng)的正常對(duì)照組比較,糖尿病各組體重下降明顯(P<0.01);與模型組相比,兩治療組體重在6周、12周時(shí)無明顯差異(P>0.05);18周時(shí),兩治療組體重較模
4、型組略有回升,有明顯差異(P<0.01);兩治療組間比較,各時(shí)段體重?zé)o明顯差異(P>0.05)。 3、與正常對(duì)照組相比,糖尿病各組1周時(shí)攝食量明顯增加(P<0.01);6周、12周、18周時(shí)攝食量均減少,有明顯差異(P<0.01.)。與模型組相比,兩治療組攝食量在1周、6周、12周時(shí)無顯著性差異(P>0.05);18周時(shí)兩治療組攝食量明顯增加(P<0.01)。兩治療組相比,1周、6周、12周時(shí)無顯著性差異(P>0.05);18周
5、時(shí)涼潤通絡(luò)組攝食量較西沙必利組為多(P<0.01)。 4、MOT濃度的比較與正常對(duì)照組比較,糖尿病各組大鼠血漿中MOT濃度均明顯升高。與模型組比較,涼潤通絡(luò)組血漿MOT濃度明顯下降(P<0.01);西沙必利組亦有所下降(P<0.05)。兩個(gè)治療組比較,涼潤通絡(luò)組更加明顯(P<0.05)。 5、CCK濃度的比較與正常對(duì)照組比較,糖尿病各組血漿中CCK濃度明顯升高。與模型對(duì)照組比較,涼潤通絡(luò)組與西沙必利組血漿CCK濃度均明顯
6、下降(P<0.01)。兩個(gè)治療組比較,涼潤通絡(luò)組血漿CCK濃度明顯下降(P<0.05)。 6、SS濃度的比較與正常對(duì)照組比較,糖尿病各組血漿SS濃度明顯下降。與模型對(duì)照組比較,涼潤通絡(luò)組血漿SS濃度明顯升高(P<0.01),西沙必利組血漿SS濃度亦有增高(P<0.05)。兩個(gè)治療組比較,涼潤通絡(luò)組血漿SS濃度明顯升高(P<0.01)。 7、小腸MOT內(nèi)分泌細(xì)胞免疫組化染色結(jié)果(1)形態(tài)學(xué)觀察:免疫反應(yīng)陽性的Mo細(xì)胞,胞
7、漿內(nèi)有淺棕色反應(yīng)物,胞核為陰性。主要分布于十二指腸腺上皮層及絨毛基底部上皮層,切面呈圓形、橢圓形、梭形、三角形等。(2)光鏡下Mo細(xì)胞測定:與正常對(duì)照組比較,模型對(duì)照組Mo細(xì)胞數(shù)顯著下降,強(qiáng)陽性細(xì)胞率則增多(P<0.01)。涼潤通絡(luò)治療組和西沙必利組Mo細(xì)胞數(shù)、強(qiáng)陽性細(xì)胞率均無顯著差異(P>0.05);與模型組比較,涼潤通絡(luò)組和西沙必利組M o細(xì)胞數(shù)顯著增多,強(qiáng)陽性細(xì)胞率顯著減少(P<0.01);兩個(gè)治療組比較Mo細(xì)胞數(shù)、強(qiáng)陽性細(xì)胞率無
8、明顯差異(P>0.05)。 8、小腸CCK內(nèi)分泌細(xì)胞免疫組化染色結(jié)果(1)形態(tài)學(xué)觀察:免疫反應(yīng)陽性的Ⅰ細(xì)胞,胞漿內(nèi)有淺棕色反應(yīng)物,胞核為陰性。主要分布于十二指腸腺及腸絨毛上皮層,切面呈圓形、橢圓形、梭形、三角形等。(2)Ⅰ細(xì)胞測定:與正常對(duì)照組比較,糖尿病各組Ⅰ細(xì)胞數(shù)顯著增加。模型對(duì)照組、西沙必利治療組強(qiáng)陽性細(xì)胞率則顯著增高(P<0.01),涼潤通絡(luò)治療組強(qiáng)陽性細(xì)胞率無顯著差異(P>0.05)。與模型組比較,涼潤通絡(luò)治療組Ⅰ細(xì)胞
9、數(shù)、強(qiáng)陽性細(xì)胞率明顯下降(P<0.01),西沙必利組Ⅰ細(xì)胞數(shù)、強(qiáng)陽性細(xì)胞率無顯著差異(P>0.05)。兩個(gè)治療組比較,涼潤通絡(luò)組Ⅰ細(xì)胞數(shù)、強(qiáng)陽性細(xì)胞率均顯著低于西沙必利組(P<0.05)。 9、胃竇SS內(nèi)分泌細(xì)胞免疫組化染色結(jié)果(1)形態(tài)學(xué)觀察:免疫反應(yīng)陽性的D細(xì)胞,胞漿內(nèi)有淺棕色反應(yīng)物,胞核為陰性,主要分布于胃竇粘膜的中、下層,偶見于上層,形態(tài)不規(guī)則。(2)D細(xì)胞測定結(jié)果:與正常對(duì)照組比較,糖尿病各組D細(xì)胞數(shù)顯著增高,強(qiáng)陽性細(xì)
10、胞率則顯著下降。與模型組比較,涼潤通絡(luò)組D細(xì)胞數(shù)顯著下降,強(qiáng)陽性細(xì)胞率顯著增高(P<0.01),西沙必利組D細(xì)胞數(shù)及強(qiáng)陽性細(xì)胞率無明顯變化(P<0.05);兩個(gè)治療組比較,涼潤通絡(luò)組D細(xì)胞數(shù)顯著下降,強(qiáng)陽性細(xì)胞率顯著增高(P<0.05)。 結(jié)論:1、本研究成功地利用STZ注射結(jié)合長時(shí)間喂養(yǎng)復(fù)制了糖尿病胃輕癱大鼠模型,且模型形成穩(wěn)定,價(jià)格低廉,操作方法比較簡單。2、認(rèn)為糖尿病胃輕癱的主要病機(jī)是陰虧燥熱血瘀,并制定了涼潤通絡(luò)方,經(jīng)實(shí)
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