茅蒼術(shù)質(zhì)量評價體系的建立與方法學(xué)研究.pdf

1、本論文以道地茅蒼術(shù)為基準(zhǔn)，結(jié)合傳統(tǒng)用藥方式和臨床療效，采用現(xiàn)代分析技術(shù)分析其揮發(fā)性及水提物不同極性部位的化學(xué)成分，探討茅蒼術(shù)道地性的主要特征成分并與不同產(chǎn)地茅蒼術(shù)比較，結(jié)合植物化學(xué)方法和現(xiàn)代分析手段建立能夠較全面反映茅蒼術(shù)豐富化學(xué)信息的指紋圖譜，作為茅蒼術(shù)的質(zhì)量評價和臨床療效的依據(jù)。主要研究內(nèi)容和結(jié)論如下：
　　 1、采用柱層析和薄層跟蹤聯(lián)用的方法對茅蒼術(shù)揮發(fā)油中主要化學(xué)成分進(jìn)行了分離，得到了6種化合物，經(jīng)理化常數(shù)、光譜學(xué)方法鑒

2、定為蒼術(shù)酮、蒼術(shù)素、茅術(shù)醇、β-桉葉醇、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ和乙酰蒼術(shù)素醇。并利用面積歸一化法進(jìn)行純度檢查，6種化合物的純度均達(dá)98％以上。
　　 2、建立了氣相色譜法同時測定茅蒼術(shù)藥材中蒼術(shù)酮、蒼術(shù)素、茅術(shù)醇和β-桉葉醇含量的分析方法。方法學(xué)考察結(jié)果表明，方法準(zhǔn)確、簡便，具有良好的重復(fù)性和穩(wěn)定性。15批不同產(chǎn)地茅蒼術(shù)藥材4種指標(biāo)性成分含量測定結(jié)果顯示，道地茅蒼術(shù)藥材與非道地茅蒼術(shù)藥材揮發(fā)性成分的主要化學(xué)成分有較明顯的差別。SPSS聚類分

3、析顯示不同產(chǎn)地茅蒼術(shù)可分為2大類，道地產(chǎn)區(qū)可與江蘇南京靈山的和江蘇宜興的及湖北英山的聚為一類，安徽霍山、河南信陽和陜西的聚為一類。
　　 3、建立了GC-MS同時測定不同產(chǎn)地茅蒼術(shù)中13種倍半萜類和多炔類成分的含量的方法。所鑒定的13種化學(xué)成分定性結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。且本研究首次采用GC-MS分析方法對蒼術(shù)中白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ(Atractylenolide)、乙酰蒼術(shù)素醇(Acetylatractylodinol)進(jìn)行了鑒定。對不同產(chǎn)地茅

4、蒼術(shù)中13種成分的含量進(jìn)行了測定，結(jié)果表明不同產(chǎn)地茅蒼術(shù)藥材揮發(fā)性成分的組成及其含量有較明顯的差別。道地茅蒼術(shù)藥材所含化學(xué)成分種類較多；江蘇鎮(zhèn)江南山樣品與道地茅蒼術(shù)差別較小，安徽和湖北兩地樣品所含化學(xué)種類與道地樣品相似，但在含量方面存在一定的差異；河南和陜西蒼術(shù)樣品的化學(xué)組成較接近，但二者所含化學(xué)成分種類較少，其中茅術(shù)醇、β-桉葉醇兩種成分之和的含量較高，占所測13種成分總含量的87-65％～97.08％。分別以13種主要成分及4種特征

5、性成分(蒼術(shù)酮、茅術(shù)醇、β-桉葉醇、蒼術(shù)素)的GC-MS數(shù)據(jù)對19個樣品進(jìn)行了SPSS聚類分析。分析結(jié)果表明，兩種聚類分析方式結(jié)果基本一致，19批不同產(chǎn)地樣品可分為兩大類，道地產(chǎn)區(qū)茅蒼術(shù)與江蘇鎮(zhèn)江南山、湖北英山、安徽毫州茅蒼術(shù)聚為一類，該類的特點是主要特征性成分為蒼術(shù)酮、茅術(shù)醇、β-桉葉醇、蒼術(shù)素，且蒼術(shù)酮與蒼術(shù)素含量之和較高；河南和陜西等地茅蒼術(shù)聚為另一類，該類的主要特點是樣品中茅術(shù)醇、β-桉葉醇含量較高，而樣品中蒼術(shù)酮含量較少或者未

6、檢出，蒼術(shù)素的含量也較低，因此該類樣品的特征性成分為茅術(shù)醇、β-桉葉醇。上述結(jié)果分析進(jìn)一步表明蒼術(shù)酮、茅術(shù)醇、β-桉葉醇、蒼術(shù)素這四種成分可作為茅蒼術(shù)質(zhì)量評價的揮發(fā)性指標(biāo)成分。
　　 4、采用中藥指紋圖譜研究技術(shù)建立了不同產(chǎn)地的茅蒼術(shù)水提物不同極性部位的指紋圖譜。通過對不同產(chǎn)地茅蒼術(shù)水提物不同極性部位指紋圖譜的研究中發(fā)現(xiàn)，石油醚部位有10個主要共有峰，乙酸乙酯部位有11個主要共有峰，正丁醇部位有14個主要共有峰。綜合3個不同部位

7、的共有峰信息，能夠較全面的反映樣品的特征性。對不同產(chǎn)地16個茅蒼術(shù)樣品進(jìn)行相似度計算，綜合分析16個樣品在不同極性部位相似度，結(jié)果表明6批道地茅蒼術(shù)的相似度較高，其他非道地茅蒼術(shù)與之相比相似度高低順序依次為：南京靈山、安徽、湖北、河南、陜西。對不同產(chǎn)地茅蒼術(shù)不同極性部位進(jìn)行綜合SPSS聚類分析表明：道地茅蒼術(shù)、南京靈山茅蒼術(shù)與安徽、湖北產(chǎn)地茅蒼術(shù)聚為一大類，河南和陜西產(chǎn)地茅蒼術(shù)聚為另一大類。該聚類分析結(jié)果與以揮發(fā)性成分為指標(biāo)的聚類分析結(jié)