嬰兒神經軸索營養(yǎng)不良的臨床及分子遺傳學研究.pdf

1、嬰兒神經軸索營養(yǎng)不良(Infantile Neuroaxonal Dystrophy，INAD，MIM 256600)是一種累及中樞及外周神經系統(tǒng)的進展性的神經系統(tǒng)變性病，為一種罕見的常染色體隱性遺傳病。發(fā)病率目前尚不清楚。本病的臨床表現為三歲以內起病，進展性的智力運動倒退，早期多有視力損害，雙側病理征陽性，逐漸進展為痙攣性截癱、癡呆、失明，一般多于10歲前死亡。肌電圖多數有失神經改變，頭顱MRI為彌漫性小腦萎縮。PLA2G6基因是目前

2、已知的此癥唯一的致病基因，編碼的基因產物為磷脂酶A2VI。到目前為止，共發(fā)現44種與PLA2G6相關的基因突變，國內只有兩篇關于INAD臨床及神經病理學特征的文獻報道，尚未見該病PLA2G6基因突變分析的報道。 目的：分析北京大學第一醫(yī)院兒科臨床診斷的11例INAD病人的臨床特征，進行PLA2G6基因分析，初步探討基因型與表型的關系，并為建立INAD的分子診斷方法、患者家庭的遺傳咨詢及產前診斷打下基礎。 方法：對北京大學

3、第一醫(yī)院兒科臨床診斷的11例(男7例、女4例)研究對象的臨床表現、影像學、肌電圖、神經病理學等特點進行分析總結。在知情同意的前提下采集外周血5ml提取DNA，運用聚合酶鏈反應和DNA直接測序的方法進行PLA2G6基因突變分析，明確基因突變類型。此部分工作均在北京大學第一醫(yī)院兒科研究室完成。 結果： 1、臨床表現：11例納入的患者均表現為三歲以內起病，進展性的智力運動倒退，雙側病理征陽性，頭顱MRI為彌漫性小腦萎縮。無其他

4、遺傳代謝性疾病證據。其中3例皮膚神經病理學檢查顯示神經軸索球樣改變。 2、基因檢測結果：除P11未發(fā)現PLA2G6基因突變外，其余10例共發(fā)現17個，10種PLA2G6基因突變，包括2種已知突變和8種新突變。10例中復合雜合突變5例，純合突變2例，還有3例到目前為止僅找到一處雜合突變。P1-P10的突變類型分別是：P1存在第二外顯子c.1 A>G起始密碼異常及c.109 C>T(p.R37X)，其中c.109為已報道突變，兩個雜

5、合突變分別來自其母親和父親；P2存在第十三外顯子c.1771C>T(p.R.591W)及第十四外顯子c.1970 C>T(p.A657V)，兩個雜合突變分別來自其母親和父親；P3存在第二外顯子c.1 A>G起始密碼異常及第八外顯子c.1111 G>A(p.V371M)，兩個雜合突變分別來自其父親和母親；P4存在第八外顯子c.1117 G>A(p.G373R)及第十二外顯子c.1633 A>G(p.K545E)，因無此患兒父母DNA故無法

6、確定其來源；P5只發(fā)現第二外顯子c.208 C>T(p.R70X)，因無其父母DNA故無法確定其來源，但是此突變造成了無義突變，因此是致病突變；P6存在第三外顯子c.238 G>A(p.A80T)及第十四外顯子c.1970 C>T(p.A657V)，兩個雜合突變分別來自其母親和父親；P7只發(fā)現第二外顯子c.1A>G起始密碼異常，且來源于其父，此突變是致病性突變；P8存在第十三外顯子c.1771C>T(p.R59lW)純合突變，其父親該位

7、點是雜合突變，無其母親DNA故無法證實其是否存在；P9存在第十內含子IVS10+1 G>A純合突變，此位點是剪切位點，故是致病性突變，其父親該位點為雜合突變，無其母親DNA故無法證實其是否存在；P10只發(fā)現第十內含子IVSl0+1 G>A雜合突變，其母親該位點未發(fā)現突變，推測此突變來自患兒父親，但是因無其父DNA故無法驗證，此突變?yōu)榧羟形稽c突變，故為致病突變。 結論： 我們在國內首次對臨床診斷的l1例INAD患者進行了P

8、LA2G6基因突變檢測，建立了INAD的PLA2G6基因診斷方法，從基因水平上確診了10患者。 本研究顯示中國INAD患者的臨床表現與既往其他民族病人的表現相似，而中國INAD患兒的基因型特點與既往報道不同，即我們所發(fā)現的突變位于第2、8、12、13、14外顯子以及內含子10的剪切位點，其中外顯子2可能為熱點突變區(qū)域(4/10病人帶有此外顯子的突變，3/10種突變位于此外顯子)，c.1 A>G起始密碼異常(3/10病人，3/17