生長激素對小鼠分泌期及著床期子宮內(nèi)膜VEGF、LIF、α-,v-β-,3-、MMP-9和TIMP-1表達的影響.pdf

1、哺乳動物胚胎著床是一個復(fù)雜的發(fā)育過程，包括胚泡與子宮內(nèi)膜之間的相互識別、定位及粘附，進而穿透子宮內(nèi)膜表面，植入內(nèi)膜基質(zhì)等步驟，它是一個胚胎與子宮內(nèi)膜在時空上相互適應(yīng)、同步協(xié)調(diào)變化的過程。一方面，胚胎不斷發(fā)育成熟，逐漸形成“侵入態(tài)”；另一方面子宮內(nèi)膜發(fā)生容受性變化，為接納胚泡建立一種“接受態(tài)”。因此，胚胎和子宮的同步協(xié)調(diào)變化不僅是胚胎著床成功與否的關(guān)鍵所在，同時也是調(diào)控胚胎著床的作用靶點。近年研究表明，著床期的胚胎和子宮內(nèi)膜除受到雌孕激素

2、的精細調(diào)節(jié)外，胚胎和子宮內(nèi)膜自身尚表達和分泌多種著床相關(guān)的蛋白因子，如血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelial growth factor，VEGF)、白血病抑制因子(leukaemia inhibitory factory，LIF)、表皮生長因子(epidermal growth factor，EGF)、整合素(Integrins)及基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)等，它們

3、以自分泌或旁分泌方式協(xié)調(diào)母胎的特殊生理狀態(tài)。有研究顯示，胚胎中特定蛋白因子的表達和分泌水平與胚胎的生長發(fā)育和著床能力密切相關(guān)。因此，這些著床相關(guān)因子的表達水平可能作為判斷胚胎發(fā)育情況、著床能力及子宮內(nèi)膜接受性的較客觀的指標或功能標記物(functional marker)。 生長激素(growth hormone，GH)是調(diào)節(jié)動物生長和發(fā)育的重要激素之一，最近的研究發(fā)現(xiàn)GH也參與了雌性動物生殖的諸多過程，在繁殖上具有重要的作用。

4、GH能調(diào)節(jié)類固醇的生成、配子的形成、性腺分化以及促性腺激素的分泌和應(yīng)答，同時增強卵泡對促性腺激素的敏感性和減少卵母細胞的調(diào)亡以利于排卵。GH通過IGF-Ⅰ依賴和不依賴兩種機制調(diào)節(jié)生殖功能，有研究表明應(yīng)用GH可提高妊娠率，這一方面可能是由于卵子質(zhì)量的改善，已得到有關(guān)實驗證實；另一方面可能是改善分泌期子宮內(nèi)膜的容受狀態(tài)。GH對排卵的影響方面報道較多，但其對子宮內(nèi)膜的影響國內(nèi)外報道均很少見。Sbracia M等最新研究發(fā)現(xiàn)人和鼠的子宮內(nèi)膜存在

5、生長激素受體，在分泌中晚期子宮內(nèi)膜腺細胞及早孕蛻膜組織中呈強陽性表達，認為生長激素在胚胎著床中起著非常重要的作用。本實驗通過動物試驗及免疫組化方法觀察GH對小鼠分泌期子宮內(nèi)膜和妊娠小鼠著床期子宮內(nèi)膜容受性相關(guān)因子VEGF、LIF、α<,v>β<,3>、MMP-9及組織金屬蛋白酶抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1)表達水平的影響，并用注射生理鹽水作為對照組，以探討GH對

6、子宮內(nèi)膜容受性的作用，為改善胚胎著床微環(huán)境，提高臨床妊娠率提供理論依據(jù)。 材料與方法 隨機將100只小鼠平均分成4組：分泌期生理鹽水(NS)組、著床期生理鹽水(NS)組、分泌期生長激素(GH)組、著床期生長激素(GH)組，用免疫組化技術(shù)檢測子宮內(nèi)膜VEGF、LIF、integrinavβ<,3>、MMP-9及TIMP-1的表達，并用組織學積分H-score方法對其進行半定量分析。數(shù)據(jù)采用SPSS 11.5軟件系統(tǒng)進行處理

7、，計量資料以平均數(shù)士標準差(x±s)表示，采用單因素方差分析判斷組間差異,兩組間數(shù)據(jù)采用兩樣本均數(shù)的t檢驗，檢驗水準為雙側(cè)檢驗a=0.05。 結(jié)論 (1)著床期小鼠子宮內(nèi)膜中VEGF、LIF、integrinavβ<,3>、MMP-9表達均呈強陽性，明顯高于分泌期子宮內(nèi)膜，VEGF、LIF、integrinavβ<,3>、MMP-9是子宮內(nèi)膜容受性的標志性分子，在胚胎植入中起重要作用； (2)MMP-9/TIMP

8、-1比值在著床期NS組大于分泌期NS組，這可能有助于胚胎植入。在正常種植期子宮內(nèi)膜中，GH組與NS組MMP-9/TIMP-1的比值都趨于1，表示MMP-9與TIMP-1在種植期小鼠子宮內(nèi)膜中的含量水平是相平衡的，提示在種植窗口期，兩者處于一種勢均力敵的制約狀態(tài)，并且保持一種動態(tài)的平衡； (3)GH組小鼠子宮內(nèi)膜VEGF、LIF、integrinavβ<,3>、MMP-9表達均強于NS組，提示GH可提高子宮內(nèi)膜接受性標記物分子的表