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文檔簡介
1、桔小實蠅和紅火蟻是2種世界性檢疫害蟲。桔小實蠅現(xiàn)已擴(kuò)散到北美洲、大洋洲和亞洲的20多個國家和地區(qū);目前在中國分布于臺灣、廣東、廣西、湖南、貴州、福建、海南、云南、四川等省區(qū);該蟲以幼蟲蛀食為害柑桔、柚子、桃、蓮霧、榴蓮、番石榴、芒果、香蕉、荔枝、龍眼等數(shù)百種栽培作物和野生植物,傳播途徑隱蔽,是當(dāng)今為害最為嚴(yán)重的農(nóng)業(yè)害蟲之一,在我國被列為進(jìn)境植物檢疫二類危險性害蟲。紅火蟻原分布于南美洲的Parana流域,目前已入侵美國、巴西、秘魯、玻利維
2、亞、阿根廷、烏拉圭、波多黎哥、澳大利亞、新西蘭、馬來西亞、安提瓜島和巴布達(dá)島、巴哈馬群島、特立尼達(dá)和多巴哥等國家和地區(qū),并在世界范圍內(nèi)呈現(xiàn)出迅速擴(kuò)散趨勢;在中國臺灣、香港、澳門、廣東、廣西和湖南等省區(qū)有分布;農(nóng)業(yè)部已將其定為中華人民共和國進(jìn)境植物檢疫性有害生物和全國植物檢疫性有害生物。紅火蟻危害人類健康,破壞生態(tài)系統(tǒng)和公共設(shè)施,影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)并耗費(fèi)巨額防治費(fèi)用。江蘇省面臨著上述兩類害蟲嚴(yán)峻的入侵趨勢,對這兩類有害生物的防控手段以進(jìn)出口貿(mào)易
3、檢疫為主。本文擬分別基于該兩種有害生物的生物學(xué)和生態(tài)學(xué)特征,應(yīng)用地理信息系統(tǒng)(Arc GIS 8.1)對其在江蘇省的入侵風(fēng)險進(jìn)行分析。此外,還嘗試應(yīng)用分子生物學(xué)的方法,以mtDNA COI基因為分子遺傳標(biāo)記,研究火蟻屬的種問關(guān)系和中國的5個紅火蟻地理種群的遺傳差異。這將助于從宏觀和微觀兩個方面認(rèn)識有害生物,了解其入侵途徑和爆發(fā)機(jī)制,為有效地控制其擴(kuò)散和危害奠定理論基礎(chǔ)。 一、桔小實蠅在江蘇省的入侵風(fēng)險分析 溫度是決定桔小
4、實蠅地理分布和擴(kuò)散趨勢的最重要的關(guān)鍵因子?;诮坌嵪壍纳飳W(xué)和生態(tài)學(xué)特性,在Excel平臺上統(tǒng)計分析了江蘇省13個站點20年的氣象數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)分析表明江蘇省是桔小實蠅的潛在適生分布區(qū);有效積溫分析表明,桔小實蠅一年內(nèi)在江蘇省可發(fā)生5-7代;基于地理信息系統(tǒng)Arc GIS 8.1的桔小實蠅地理分布預(yù)測圖表明其潛在的高發(fā)期為7月下旬和8月上旬;預(yù)測結(jié)果還顯示,桔小實蠅在常州、溧陽、蘇州、南京和呂泗等31°N-32°N地區(qū)有相對較好的適生性。
5、 二、紅火蟻在江蘇省的入侵風(fēng)險分析 紅火蟻的適生情況取決于某一地區(qū)蟻后是否能夠產(chǎn)生一定臨界數(shù)量有翅蟻,而低溫導(dǎo)致過低的生殖率和越冬死亡則證明紅火蟻不適合在該地區(qū)生存繁衍。雖然海拔高度和降雨量可能對紅火蟻的分布與擴(kuò)散能產(chǎn)生影響,但是在分析了江蘇的農(nóng)業(yè)地理概況和江蘇省13個站點20年的氣象數(shù)據(jù)后,海拔高度和降雨量不會限制其在江蘇省的分布與擴(kuò)散。數(shù)據(jù)分析表明江蘇省是紅火蟻的潛在適生分布區(qū);有效積溫分析表明,紅火蟻一年內(nèi)在江蘇省
6、可發(fā)生1-3代;基于地理信息系統(tǒng)Arc GIS 8.1的紅火蟻地理分布預(yù)測圖表明其潛在的高發(fā)期為7月下旬和8月上旬;預(yù)測結(jié)果還顯示,紅火蟻在常州、溧陽、蘇州、南京和呂泗等31°N-32°N地區(qū)有有較高的入侵風(fēng)險。 三、中國紅火蟻種群分子遺傳結(jié)構(gòu)的初步研究 分子遺傳標(biāo)記己經(jīng)被國內(nèi)外眾多學(xué)者廣泛應(yīng)用于昆蟲學(xué)的各個領(lǐng)域,如分類鑒定、系統(tǒng)分化、害蟲防治、生態(tài)適應(yīng)等。目前分子生物學(xué)技術(shù)在外來有害生物入侵風(fēng)險研究中主要應(yīng)用于有害生物
7、的診斷、近緣種的分類鑒定和群體間系統(tǒng)發(fā)育分析兩個方面。建立在豐富的核酸序列信息的分析基礎(chǔ)之上的分子種群系統(tǒng)發(fā)育分析,有助于更深入地了解有害生物種問關(guān)系和種群的遺傳變異、起源、進(jìn)化和入侵、定殖及擴(kuò)散等問題。線粒體細(xì)胞色素氧化酶亞基Ⅰ(mtDNA COI)基因適合用來分析親緣關(guān)系較近的種、種下分類階元以及地理種群之間的系統(tǒng)關(guān)系。本研究采用DNA序列分析法,對采自中國不同地區(qū)紅火蟻的mtDNA COI基因序列進(jìn)行比較,分析并揭示紅火蟻與其相似
8、種的關(guān)系及紅火蟻各地理種群間的遺傳差異。 試驗用紅火蟻于2005-2006年采集于廣東吳川市、廣西北流市、廣西陸川市、廣西岑溪市和湖南張家界市,保存于100%乙醇中。采用UNIQ-10柱式動物基因組DNA抽提試劑盒提取紅火蟻的基因組DNA。應(yīng)用合適的引物對其進(jìn)行PCR擴(kuò)增,歷經(jīng)PCR產(chǎn)物回收純化、連接和轉(zhuǎn)化后用擴(kuò)增引物做測序引物。經(jīng)PCR檢測后將陽性克隆用于測序。每個地理種群隨機(jī)抽取至少3個樣本進(jìn)行測序,以其一致序列為準(zhǔn)。最終成
9、功的擴(kuò)增出長度為965 bp的mtDNA COI中央序列。將獲得的DNA序列先提交到GenBank數(shù)據(jù)庫中,然后利用NCBI站點“BLAST”工具進(jìn)行序列分析、DNA序列檢索。并引入阿根廷12個地區(qū)和巴西8個地區(qū)的紅火蟻mtDNA COI序列,以阿根廷和巴西的火蟻屬其它8個種mtDNA COI序列作為外群,用GenDoc軟件進(jìn)行序列同源性比較;用BioEdit軟件進(jìn)行序列編輯;用Clustal X軟件進(jìn)行序列比對;比對結(jié)果輸入MEGA
10、2.1軟件,用鄰接法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。 研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),利用mtDNA COI序列作為分子遺傳標(biāo)記可以較好的解決紅火蟻與其近似種的區(qū)分問題。火蟻屬其它種如 S. pusillignis、S. eZectea、S. daguerrei、S. megergates、S. macdonaghi、S. interrupta 作為外群較先以極高的置信度被劃分出來,與紅火蟻S.invicta分別處于不同的進(jìn)化分支上。中國的紅火蟻種群在進(jìn)化上被分
11、為兩個分支,但是它們都和阿根廷的紅火蟻親緣關(guān)系較近。紅火蟻廣西陸川種群、廣西北流種群和湖南張家界種群的親緣關(guān)系較近,和阿根廷一部分種群處于同一支內(nèi);而由于紅火蟻廣西岑溪種群和廣東吳川種群的序列完全相同,它們和阿根廷紅火蟻另外一些地理種群處于一個較大的分支內(nèi)。紅火蟻傳入中國的歷史不長,分子進(jìn)化水平上的差異不會相差太大,因此推測中國紅火蟻很可能起源于阿根廷或其他南美地區(qū),但是進(jìn)入的時間和途經(jīng)可能有別。5個地理種群間遺傳分化程度總體而言比較低
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