龍花方總黃酮提取分離及不同配比的主要藥效學比較研究.pdf

1、目的：對花生衣的質量標準進行初步研究；以總黃酮含量為指標對龍花方中仙鶴草、花生衣的提取工藝進行考察，優(yōu)選提取工藝條件；以總黃酮含量為指標，對仙鶴草、花生衣中總黃酮進行純化，優(yōu)選純化工藝條件；對提純后的兩種總黃酮進行組分配伍進而進行不同配比的藥效學比較研究，在此基礎上為該復方后續(xù)物質基礎的研究及制劑開發(fā)提供系統(tǒng)、全面的數(shù)據(jù)及理論支撐。
　　方法：按《中國藥典》2010年版一部附錄IX H中水分測定法中的第一法，附錄IX K灰分測定法

2、和酸不溶性灰分測定法和附錄X A浸出物測定法測定。采用單因素篩選結合響應面設計法試驗，對影響總黃酮含量的提取次數(shù)、乙醇濃度、液料比與提取時間對龍花方中的仙鶴草與花生衣的提取工藝進行考察，確定出最佳的工藝參數(shù)；以總黃酮的吸附率和解吸率為指標，考察仙鶴草和花生衣中總黃酮的樹脂的吸附及洗脫條件。腹腔注射環(huán)磷酰胺對小鼠造成血小板減少模型，采用針對小復方的基線等比設計法擬定兩種總黃酮的配比處方。觀察不同處方對模型小鼠外周血小板、紅細胞、血紅蛋白，

3、臟器指數(shù)的影響。
　　結果：花生衣中水分不得超過9.6%，灰分不得超過2.5%，酸不溶性灰分不得超過0.27%，水浸出物不得超過11.9%，醇浸出物不得超過25.7%，薄層色譜法可用于鑒別花生衣，高效液相色譜法測定的兒茶素含量穩(wěn)定。仙鶴草的最佳提取工藝為：提取溶劑為50%乙醇，液料比為20倍，提取時間為70min，提取3次，在提取工藝下，仙鶴草總黃酮平均提取率為9.5%?；ㄉ碌淖罴烟崛」に嚍?提取溶劑為40%乙醇，液料比為15倍

4、，提取時間為30min，提取3次。在此提取工藝下，花生衣總黃酮的平均提取率為27.21%。D-101型大孔樹脂對仙鶴草和花生衣中總黃酮有較好的分離純化作用。仙鶴草的最佳純化工藝為徑高比為1:10，上樣藥液濃度為0.15g·mL-1，上樣藥液流速為1BV/h，水洗4BV，洗脫溶劑為50%的乙醇，醇洗3BV，純化后總黃酮純度比純化前提高了30%左右?；ㄉ碌淖罴鸭兓に嚍閺礁弑葹?:15，上樣藥液濃度為0.1g·mL-1，上樣藥液流速為2B

5、V/h，水洗3BV，洗脫溶劑為70%的乙醇，醇洗3BV，純化后總黃酮純度比純化前提高了30%左右。5個處方均能提高造模小鼠的血小板數(shù)，處方4作用較為明顯（P＜0.01)，對白細胞數(shù)，紅細胞數(shù)、胸腺指數(shù)脾臟指數(shù)及體重變化值也有一定的升高趨勢。
　　結論：本實驗初步對花生衣的質量標準進行了研究，為以后花生衣資源的合理利用奠定了基礎；龍花方中的仙鶴草、花生衣中總黃酮的提取分離純化工藝穩(wěn)定，可行；優(yōu)選出的處方能顯著的提高造膜小鼠的血小板數(shù)