抑制茄子黃萎菌的植物提取物的篩選與研究.pdf

1、隨著生活水平的改善，既能帶給人健康又口感很好的蔬菜和水果，越來越得到人們的重視，由于近年來研究揭示茄果類蔬菜具有豐富的營(yíng)養(yǎng)和抗癌、防衰老等特殊的功效，使得茄果類蔬菜成為人們餐桌上不可或缺的食品，受到人們的喜愛，而生產(chǎn)中其設(shè)施栽培的面積也不斷擴(kuò)大。然而，設(shè)施化和專業(yè)化生產(chǎn)中，連作栽培不可避免，黃萎病成為當(dāng)前亟待解決的重大植物病害。本試驗(yàn)以近年來對(duì)植物源殺菌劑的研究為基礎(chǔ)，根據(jù)本試驗(yàn)的特點(diǎn)，選擇了較為方便、有效的研究方法，廣泛選取試材，主要

2、從前人很少研究的園藝作物入手，尋找對(duì)茄子黃萎病有抑制作用的植物資源，并通過植物的生長(zhǎng)、生理變化，為植物提取物的抗病研究提供理論基礎(chǔ)。此外，對(duì)植物提取物抑菌效果的影響因素也作了一定研究，為植物提取物的提取、保存和使用，以及其它相關(guān)研究提供初步的依據(jù)。本試驗(yàn)研究結(jié)果如下： 1．在選取的23科73種植物材料中，通過菌絲生長(zhǎng)速率法和孢子懸滴法的室內(nèi)生物測(cè)定以及田間驗(yàn)證試驗(yàn)得出，對(duì)茄子黃萎菌有抑制作用的植物有葡萄葉、大蔥葉、丁香枝葉、薄荷

3、葉、辣椒葉、番茄葉、醉蝶根、南瓜葉、韭菜葉、核桃葉、銀杏葉、大薊葉、藿香葉、苣賣菜葉、萬壽菊葉、柳枝葉、花椒果、橘皮等，其中葡萄葉和大蔥葉具有較高的抑菌活性，菌絲生長(zhǎng)抑制率分別為68.44％和61.31％，孢子萌發(fā)抑制率分別為99.54％和95.52％，田間試驗(yàn)的防護(hù)效果分別為75.76％和71.72％，田間試驗(yàn)的治療效果分別為68.62％和60.79％。其抑菌效果與茄子病菌凈藥劑相當(dāng)，有望應(yīng)用于茄子黃萎病的防治。 2．試驗(yàn)中也

4、發(fā)現(xiàn)了抑菌活性成分在植物中的分布規(guī)律，可為植物源殺菌力的植物資源篩選研究提供依據(jù)。如：同種植物對(duì)不同菌種表現(xiàn)抑制或促進(jìn)的作用不同；已報(bào)道的具有抑菌活性的植物，對(duì)其它菌種可能也有抑制作用；具有揮發(fā)性物質(zhì)的植物、野生性較強(qiáng)的植物，可能具有抑菌活性；同科的不同植物表現(xiàn)對(duì)菌種的抑制或促進(jìn)作用，以及活性的強(qiáng)弱，有很大不同；有效成分的種類和含量在植物體中的分布部位不同，草本植物中一般存在著：葉>根>莖>花的分布規(guī)律，木本植物大多具有一定程度的抑菌活

5、性，且存在著枝>葉的規(guī)律；處于不同生長(zhǎng)時(shí)期的同一植物，其抑菌活性的強(qiáng)弱不同，一般表現(xiàn)為生長(zhǎng)后期強(qiáng)于生長(zhǎng)前期，腐敗死亡的植株基本無活性。 3．僅通過室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)，并不能確定對(duì)田間生產(chǎn)實(shí)際一定有效。這其中可能有許多其它的因素影響。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，辣椒葉、番茄葉、核桃葉在室內(nèi)的生物測(cè)定試驗(yàn)中表現(xiàn)了很好的抑制效果，而它們的田間試驗(yàn)效果卻不大明顯。 4．總體來看，植物提取物的施用對(duì)于茄苗的生長(zhǎng)是有益的。本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過植物提取物

6、處理的茄苗，與對(duì)照相比，生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)壯，根系發(fā)達(dá)，葉幅加寬，株高、莖粗和鮮重增加，根系活力旺盛，植株的免疫力得到加強(qiáng)。生理方面，與對(duì)照相比，電導(dǎo)率低，脯氨酸和可溶性糖含量較高，因而細(xì)胞的滲透調(diào)節(jié)能力增強(qiáng)，可有效減輕病原菌對(duì)細(xì)胞的傷害。并且在細(xì)胞的防御酶系統(tǒng)變化的研究中發(fā)現(xiàn)，葡萄葉、大蔥葉提取物處理的茄苗，SOD、POD、CAT和PAL的活性顯著高于對(duì)照，且短時(shí)間酶的活性即可達(dá)到高峰，因而其能夠及時(shí)清理過氧化物等的傷害，產(chǎn)生對(duì)病原菌有抑制作用

7、的酚類物質(zhì)、木質(zhì)素、植保素等抗病相關(guān)物質(zhì)，抵御病原菌對(duì)植物提的傷害，因而提高了植物的抗病性。 5．不同的植物材料最適合的提取溶劑不同。葡萄葉的最佳浸提溶劑為80％丙酮：80％乙醇(1：1)，而大蔥葉的最佳浸提溶劑為80％乙醇。但在大批量比較篩選試驗(yàn)時(shí)，可先采用80％乙醇作為提取溶劑，因?yàn)槠錈o毒性，且與大多數(shù)植物活性成分的溶解性較好。而80％丙酮也是對(duì)于大多數(shù)植物具有較好溶解性的溶劑。 6．本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，對(duì)植物提取物的普遍

8、最適提取方式為：超聲波40min，其提取效能明顯好于恒溫震蕩提取，且節(jié)約時(shí)間、提取充分。 7．提取的溫度可因不同植物提取物而異。葡萄葉提取物的熱穩(wěn)定性較高，因此，在提取時(shí)可適當(dāng)加溫促進(jìn)溶解。而大蔥葉提取物的熱穩(wěn)定性很差，在高溫情況下抑菌活性很低，因此，在提取時(shí)以-5℃～50℃的范圍為宜。此外還發(fā)現(xiàn)，溫度較低的情況下，提取物的性質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定，但活性物質(zhì)在溶劑中的溶解速度較慢，溫度較高時(shí)，雖然可以提高活性物質(zhì)在水中的溶解速度，但同時(shí)也

9、易分解變性。對(duì)于未知的植物提取物，可選擇常溫作為提取溫度。 8．試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，不同植物提取物對(duì)溫度的要求不同。葡萄葉提取物的熱穩(wěn)定性較高，保存時(shí)對(duì)溫度的要求不大。而大蔥葉提取物的熱穩(wěn)定性很差，高溫下抑菌活性很低，保存的溫度不應(yīng)超過50℃。此外，由于微生物的活動(dòng)可使提取物的活性物質(zhì)分解變性，因此對(duì)于葡萄葉這類熱穩(wěn)定性相對(duì)較好的植物提取物可采用高壓滅菌來提高保存質(zhì)量和延長(zhǎng)保存時(shí)間，對(duì)于未知植物提取物，保存溫度可選擇在-5℃～4℃，使用

10、時(shí)溫度范圍可在-5℃～50℃。 9．光照對(duì)植物提取物的穩(wěn)定性也有一定影響，這因不同的植物而異，總體來看，光照對(duì)提取物的活性影響不大，但光照時(shí)間延長(zhǎng)對(duì)植物提取物的抑菌活性不利。一般來說，避光保存可以使提高植物提取物的穩(wěn)定性。 10．葡萄葉提取物和大蔥葉提取物在中性或微堿性的環(huán)境下，仍保持較高的抑菌活性，在強(qiáng)酸性條件下抑菌活性均很低。因此，保存時(shí)應(yīng)將植物提取物置于中性或弱堿性的環(huán)境中。 11．葡萄葉提取物和大蔥葉提取