巖靜脈離斷動物模型的建立及巖靜脈離斷對兔腦組織的影響.pdf

1、背景：1929年,Dandy教授在其文章中插圖展示了一支走行于橋小腦角區(qū)域并經(jīng)三叉神經(jīng)背側(cè)匯入巖上竇的靜脈,此靜脈便是后來眾所周知的巖靜脈。巖靜脈是非常重要且相對恒定的解剖標志,在涉及天幕以及橋小腦角區(qū)病變的手術(shù)中扮演重要角色。
　　 袁賢瑞教授回顧2004年6月至2007年10月進行的聽神經(jīng)瘤手術(shù)33例,其中2例手術(shù)中巖靜脈被電凝處理,31例保護良好。31例巖靜脈保護良好的患者術(shù)后恢復(fù)良好,2例電凝處理巖靜脈的患者繼發(fā)小腦出血

2、性梗死并水腫；1例死亡,1例經(jīng)后顱窩減壓后病情好轉(zhuǎn)。因此,袁賢瑞教授認為手術(shù)中應(yīng)當妥善保護巖靜脈,這一觀點得到很多學(xué)者的支持；但亦有部分學(xué)者認為手術(shù)中離斷巖靜脈對術(shù)后效果影響不大。目前,文獻中未查及關(guān)于巖靜脈的動物實驗研究。
　　 目的：建立家兔單側(cè)巖靜脈離斷(雙極電凝燒灼后,顯微剪剪斷)動物模型,觀察巖靜脈離斷后家兔腦組織病理結(jié)構(gòu)、含水量、鈉鉀離子含量、SOD活力、MDA含量及AQP-4轉(zhuǎn)錄與表達。
　　 方法：1.選

3、用健康家兔10只(雌雄不限),解剖分離其頸動脈及頸靜脈,應(yīng)用硅橡膠對新鮮家兔尸頭進行灌注。解剖觀察灌注好的家兔尸頭標本,比較家兔與人類巖靜脈的解剖結(jié)構(gòu)。2.健康成年家兔144只隨機分成兩組,即假手術(shù)組與巖靜脈離斷組。每組按處死時間點即手術(shù)操作后4h、8h、12h、24h、48h、72h分成六個亞組,每個亞組12只家兔。每個亞組中取6只獲取標本后,干濕重法檢測小腦及腦干組織含水量；原子火焰吸收分光光度法檢測鈉鉀離子含量；黃嘌呤氧化酶法檢測

4、SOD活力；硫代巴比妥酸(TBA)法檢測MDA含量,RT—PCR檢測AQP-4mRNA轉(zhuǎn)錄。亞組中另外六只采用HE染色、尼氏染色及電鏡觀察腦組織病理結(jié)構(gòu)改變；免疫組織化學(xué)檢測AQP-4蛋白表達。
　　 結(jié)果：
　　 1.家兔尸頭灌注血管色澤鮮艷,細小血管顯示良好,解剖結(jié)構(gòu)保留完整,其巖靜脈解剖結(jié)構(gòu)與人類相似。
　　 2.含水量及鈉鉀離子含量:A小腦組織:假手術(shù)組各亞組腦組織含水量、鈉鉀離子含量無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0

5、.05):巖靜脈離斷后4h、8h、12h、24h組腦組織含水量、鈉離子含量高于假手術(shù)組(p＜0.05),巖靜脈離斷后4h、8h、12h、24h組腦組織鉀離子含量低于假手術(shù)組(p＜0.05)；巖靜脈離斷后4h腦組織含水量、鈉離子含量增加,8—12達高峰,持續(xù)至24小時(p＜0.05),鉀離子含量自4h降低,8-12小時降至最低(p＜0.05)。B腦干組織:假手術(shù)組各亞組腦組織含水量、鈉鉀離子含量無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0.05)；巖靜脈離斷后4

6、h腦組織含水量、鈉離子含量高于假手術(shù)組(p＜0.05),鉀離子含量低于假手術(shù)組(p＜0.05)。
　　 3.小腦組織病理結(jié)構(gòu)改變:假手術(shù)組小腦組織神經(jīng)細胞結(jié)構(gòu)基本正常,巖靜脈離斷后4h、8h、12h出現(xiàn)水腫,表現(xiàn)為細胞腫脹,尼氏體消失,神經(jīng)細胞變性壞死等。腦干組織病理結(jié)構(gòu)改變:巖靜脈離斷4h組出現(xiàn)細胞水腫,巖靜脈離斷組其余各亞組與假手術(shù)組病理結(jié)構(gòu)基本正常。
　　 4.SOD活力檢測:A小腦組織:假手術(shù)組之間SOD活力無統(tǒng)

7、計學(xué)差異(p＞0.05)；巖靜脈離斷后4h、8h、12h、24h腦組織SOD活力低于假手術(shù)組(p＜0.05):巖靜脈離斷后4h腦組織SOD活力下降,8-12至最低,持續(xù)至24小時(p＜0.05)。B腦干組織:假手術(shù)組各亞組腦組織SOD活力無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0.05)；巖靜脈離斷后4h腦組織SOD活力低于假手術(shù)組(p＜0.05)。
　　 5.MDA含量檢測:A小腦組織:假手術(shù)組之間MDA含量無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0.05)；巖靜脈離斷

8、后4h、8h、12h、24h腦組織MDA含量高于假手術(shù)組(p＜0.05)；巖靜脈離斷后4h腦組織MDA含量上升,8-12達高峰,48-72小時接近假手術(shù)組(p＜0.05)。B腦干組織:假手術(shù)組各亞組腦組織MDA含量無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0.05)；巖靜脈離斷后4h腦組織MDA含量高于假手術(shù)組(p＜0.05)。
　　 6.AQP-4轉(zhuǎn)錄與表達:A小腦組織:假手術(shù)組各亞組腦組織AQP-4轉(zhuǎn)錄及表達無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0.05)；巖靜脈離斷

9、后4h、8h、12h、24h腦組織AQP-4轉(zhuǎn)錄與表達增強(p＜0.05)。B腦干組織:假手術(shù)組各亞組腦組織AQP-4轉(zhuǎn)錄及表達無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0.05)；巖靜脈離斷后4h腦組織AQP-4轉(zhuǎn)錄及表達強于假手術(shù)組(p＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.家兔具有與人類相似的巖靜脈結(jié)構(gòu)及引流,從解剖學(xué)角度講,家兔可用于建立巖靜脈離斷動物模型。
　　 2.巖靜脈離斷組4h、8h、12h、24h亞組小腦組織含水量及鈉

10、離子含量較假手術(shù)對照組增加,鉀離子含量降低。表明巖靜脈離斷引起鈉鉀ATP酶功能障礙,導(dǎo)致小腦組織水腫。
　　 3.巖靜脈離斷導(dǎo)致家兔腦組織病理結(jié)構(gòu)改變,此結(jié)構(gòu)改變?yōu)榭赡嫘浴?br>　　 4.巖靜脈離斷組4h、8h、12h、24h亞組小腦組織較假手術(shù)對照組小腦組織MDA含量增加,SOD活力下降。表明腦細胞代謝及功能障礙,清除氧自由基的能力下降。提示對抗氧自由基可能有助于腦組織功能恢復(fù)。
　　 5.巖靜脈離斷組4h、8h、