犬角膜移植方法的建立及聯(lián)合用藥對角膜移植愈合效果影響的研究.pdf

1、全層角膜移植術(shù)，是用健康透明的供體角膜替代病變的宿主角膜，最常適用于圓錐形角膜、重復(fù)角膜移植、角膜營養(yǎng)不良，各種原因所致的角膜白斑、角膜損傷和角膜血染等，也適用于角膜溶解的患者，例如嚴(yán)重的角膜感染后引起角膜穿孔的患者。為了探索臨床上預(yù)防犬角膜移植免疫排斥反應(yīng)的方法以及促進(jìn)術(shù)后角膜愈合的方法，本實(shí)驗(yàn)聯(lián)合采用妥布霉素、地塞米松(DEX)、環(huán)孢素A(CsA)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)點(diǎn)眼治療，通過對犬角膜水腫、渾濁度、新生血管、熒光

2、素鈉染色的臨床評分，眼內(nèi)壓、淚液量、外周血白細(xì)胞數(shù)目的檢測和角膜病理切片的觀察，評價(jià)聯(lián)合用藥對犬穿透性角膜移植的治療效果，為臨床上犬角膜移植的臨床治療提供理論依據(jù)。
　　選取健康實(shí)驗(yàn)犬54只，年齡1歲左右，體重4-8kg，36只為受體犬，18只為供體犬。將36只受體犬平均分為四組，每組9只:A組為妥布霉素滴眼組;B組為妥布霉素+地塞米松滴眼組;C組為妥布霉素地塞米松+環(huán)孢素滴眼組;D組為妥布霉素+地塞米松+環(huán)孢素+bFGF（堿性成

3、纖維細(xì)胞生長因子）滴眼組。A、B、C、D組每種藥間隔30min點(diǎn)眼一次，1-2滴/次，4次/天。術(shù)后每日觀察術(shù)眼的分泌物情況，分別在術(shù)后3、7、14、21、35d時(shí)根據(jù)眼裂隙燈觀察情況對角膜的渾濁度、新生血管、水腫情況以及熒光素鈉染色情況評分，同時(shí)進(jìn)行血常規(guī)檢查、眼壓測量和淚液量的測量，分別在術(shù)后第14d和35d摘取眼球做病理組織切片觀察。結(jié)果如下:
　　(1)犬角膜移植方法的探索:本實(shí)驗(yàn)對所有犬術(shù)前3d剃毛，避免了手術(shù)當(dāng)天的污染

4、和刺激;采用呼吸麻醉的方式，保證動(dòng)物在手術(shù)過程中處于安靜的狀態(tài);為了充分暴露眼球，所有手術(shù)都實(shí)行了外眼角切開;手術(shù)均在眼科顯微鏡下操作，保證了縫合深度的一致;術(shù)后所有犬佩戴伊麗莎白項(xiàng)圈單獨(dú)飼養(yǎng)，這些都提高了手術(shù)的效率和成功率。
　　(2)犬角膜渾濁度比較:第3d時(shí)，各組角膜均有輕微混濁度，差異不顯著(p＞0.05);第7d時(shí)，A組、B組混濁度稍有增加，與第0d相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);第14d時(shí)，四組實(shí)驗(yàn)犬角膜混濁度均有增

5、加，A組混濁度最高，D組與A組相比差異顯著(p＜0.05);第21d時(shí)，A、B兩組角膜混濁度繼續(xù)增加，D組混濁度降低，與A組相比差異極顯著(p＜0.01);第35d時(shí)，A組角膜混濁度達(dá)到峰值，其余三組均有下降，D組完全透明，與A組相比差異極顯著(p＜0.01)。
　　(3)犬角膜新生血管比較:第3d時(shí)，所有角膜均未見新生血管出現(xiàn);第7d時(shí)，A組角膜開始出現(xiàn)新生血管，D組與A組相比差異顯著(p＜0.05);第14d時(shí)，B組角膜也有新

6、生血管出現(xiàn)，但少于A組，D組與A組相比差異極顯著(p＜0.01);第21d時(shí)，A、B兩組新生血管長度增加，C、D兩組有少量新生血管出現(xiàn)，D組與A組相比差異極顯著(p＜0.01);第35d時(shí)，A、B兩組角膜新生血管達(dá)到最大值， D組與A組相比差異極顯著(p＜0.01)。
　　(4)犬角膜水腫對比:第3d時(shí)，所有實(shí)驗(yàn)犬角膜均有輕度水腫;第7d時(shí)，A組角膜水腫最重，D組與A組相比差異顯著(p＜0.05);第14d時(shí)，A、B兩組角膜水腫加

7、重;第21d時(shí)B、D兩組角膜水腫程度開始減輕，與A組相比差異極顯著(p＜0.01);第35d時(shí)A組角膜水腫程度達(dá)到最高，其余三組均有下降，D組水腫完全消除，與A組相比差異極顯著(p＜0.01)。
　　(5)熒光素鈉染色對比:第3d時(shí)，四組犬角膜均有著色，未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);第7d以后，D組角膜著色面積明顯少于前三組，與A組相比差異極顯著(p＜0.01)。
　　(6)眼內(nèi)壓對比:術(shù)后3d時(shí)，所有實(shí)驗(yàn)犬眼壓較低，在術(shù)

8、后7d開始時(shí)眼壓全部在正常值范圍內(nèi)，D組眼壓恢復(fù)最快，與A組相比差異極顯著(p＜0.01)。
　　(7)淚液量對比:第3d時(shí)，所有組實(shí)驗(yàn)犬淚液量分泌均有增加，第7d時(shí)，B、C、D三組犬淚液量開始有下降趨勢，D組淚液量恢復(fù)速度最快，到21d時(shí)C、D兩組淚液量基本恢復(fù)至正常值范圍，D組與A組相比差異極顯著(p＜0.01)。
　　(8)組織切片觀察:A組犬角膜基質(zhì)層纖維排列最混亂，上皮恢復(fù)速度較慢，并且在術(shù)后第35d時(shí)有上皮與基質(zhì)