甲狀腺素聯(lián)合多奈哌齊對成年期甲減大鼠前額葉乙酰膽堿、munc-18的影響.pdf

1、目的：
　　觀察甲狀腺素聯(lián)合多奈哌齊對成年期甲狀腺功能減退癥（甲減）大鼠前額葉內(nèi)乙酰膽堿含量以及 munc-18表達(dá)的影響，探討甲減前額葉可能的分子損傷機(jī)制及其恢復(fù)的因素。
　　方法：
　　健康成年期SD大鼠40只，雄性，普通級，適應(yīng)喂養(yǎng)1周，隨后將大鼠隨機(jī)分為5組，每組8只:正常對照組、甲減組、多奈哌齊治療組、甲狀腺素治療組、聯(lián)合治療組。正常對照組飲水，其余4組飲用0.05％丙基硫氧嘧啶（PTU）水6周造甲減模型。第

2、5周起，繼續(xù)上述方法甲減造模同時，多奈哌齊治療組每日飲用含0.005%的多奈哌齊的水，甲狀腺素治療組每日給予L-T46μg/100 g體重腹腔注射，聯(lián)合治療組每日予飲用水中加入0.005%的多奈哌齊以及6μg/100 g體重劑量的L-T4腹腔注射。另外，沒有L-T4腹腔注射的3組老鼠每日給予等量的無菌生理鹽水腹腔注射。5組老鼠每周稱重1次，根據(jù)體重調(diào)整給藥劑量，治療時間總計(jì)2周。6周造模時間后，采血取腦，放射免疫法測定血清甲狀腺激素水平

3、；堿性羥胺比色法測定左側(cè)前額葉內(nèi)乙酰膽堿含量；右側(cè)前額葉行免疫組織化學(xué)檢測，光學(xué)顯微鏡拍攝各組大鼠前額葉內(nèi)五層：分子層（Ⅰ層）、外顆粒層（Ⅱ?qū)樱⑼忮F體細(xì)胞層（Ⅲ層）、內(nèi)顆粒層（Ⅳ層）、內(nèi)錐體細(xì)胞層（Ⅴ層），以各層內(nèi)munc-18的免疫反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行光密度值分析，以平均光密度（average optical density,AOD）作為分析指標(biāo)，觀察munc-18在大鼠前額葉內(nèi)各層的表達(dá)與其分布。
　　結(jié)果：
　　1.老鼠血清

4、甲狀腺激素水平：甲減組、多奈哌齊治療組大鼠血清三碘甲狀腺原氨酸（T3）、四碘甲狀腺原氨酸（T4）水平明顯減低，而血清促甲狀腺激素（TSH）水平顯著提高(P<0.01)，其余兩組的血清T3、T4、TSH與正常對照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　2.老鼠前額葉乙酰膽堿含量：與正常對照組比，甲減組大鼠前額葉內(nèi)乙酰膽堿含量明顯下降(P<0.05)，其余三組額葉內(nèi)乙酰膽堿含量均恢復(fù)至正常對照組水平，其中聯(lián)合治療組有進(jìn)一步恢復(fù)趨勢；
　　3.

5、老鼠前額葉munc-18表達(dá)：甲減組、多奈哌齊治療二組大鼠munc-18在額葉內(nèi)各層表達(dá)下降(P<0.05)。其中，以Ⅲ/Ⅴ層下降最為顯著(P<0.01)，甲狀腺素替代治療后munc-18表達(dá)仍然下降(P<0.05)，聯(lián)合治療組munc-18在前額葉內(nèi)表達(dá)恢復(fù)至正常對照組水平。
　　結(jié)論：
　　1.成年期甲減可導(dǎo)致大鼠前額葉的乙酰膽堿含量、munc-18表達(dá)下降。
　　2.單一甲狀腺素治療可以使前額葉內(nèi)乙酰膽堿含量恢復(fù)