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2、行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特另tl;DN以標(biāo)注等內(nèi)容外,文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫,文責(zé)自負(fù)。研究生簽名:溯鑫嗡導(dǎo)師簽章乏年月日中文摘要Beclinl是p53調(diào)節(jié)白藜蘆醇誘導(dǎo)人結(jié)腸癌HCT一116細(xì)胞自噬的關(guān)鍵分子摘要目的:白藜蘆醇(Resveratrol,I峪V)具有多種生物學(xué)作用。在體外實(shí)驗(yàn)中白藜蘆醇可抑制腫瘤細(xì)胞的生長,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和自噬,但其機(jī)制尚不清楚
3、。有研究表明p53能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和自噬,但由于條件差異p53對細(xì)胞凋亡和自噬的作用不盡相同。本實(shí)驗(yàn)擬通過研究白藜蘆醇對HCT116p53竹和HCT116p53乒細(xì)胞生長的影響,檢測白藜蘆醇作用下細(xì)胞自噬情況及p53對細(xì)胞白噬的影響、p53與自噬相關(guān)蛋白的相互關(guān)系以及自噬對細(xì)胞生存的影響。方法:1real—timePCR法和westemblot法驗(yàn)證HCT116p5糾。細(xì)胞p53敲除情況,分析HCT116p53冊細(xì)胞在白藜蘆醇作用下p5
4、3mRNA和蛋白的表達(dá)變化。2用不同濃度白藜蘆醇處理對數(shù)生長期HCT116p53卅和HCT116p534細(xì)胞24h,倒置顯微鏡下觀察兩種細(xì)胞形態(tài)變化。通過MTT法檢測不同濃度白藜蘆醇處理HCT116p53卅和HCT116p53_卜細(xì)胞24h后細(xì)胞生存率變化。3免疫熒光檢測自噬標(biāo)志蛋白LC3,觀察在白藜蘆醇作用后HCT116p53姍和HCT116p53乒細(xì)胞中LC3的表達(dá)變化。4westernblot法檢測HCT116p53坍和HCT11
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