四川漢族和彝族家系KIR單體型研究.pdf

1、第一部分，四川漢族何彝族家系KIR單體型研究
　　 目的：
　　 通過家系分析，了解四川漢族和彝族家系KIR單體型的基因組成情況。
　　 方法：
　　 采集21個四川漢族家系口腔粘膜標(biāo)本，89個四川彝族家系EDTA抗凝靜脈血標(biāo)本，提取基因組DNA。用多重PCR-SSP的方法對16個KIR基因位點進(jìn)行基因分型，并分別測定了3DP1和2DS4的2組亞型。根據(jù)KIR基因型結(jié)合家系分析推導(dǎo)KIR單體型。對部分樣本

2、中某些不能確定拷貝數(shù)的KIR基因，進(jìn)行熒光定量PCR分析，測定該KIR基因的相對拷貝數(shù)，再結(jié)合家系分析，得到其KIR單體型。
　　 結(jié)果：
　　 21個四川漢族家系中共發(fā)現(xiàn)13種KIR基因型，12種KIR單體型，其中有2種A單體型，10種B單體型。四川漢族家系中基因型1、3、4、5有3種單體型組合方式，基因型2、8、68有2種單體型組合方式，基因型6、7、9、69、72、75分別只有1種組合方式。89個四川彝族家系中發(fā)現(xiàn)

3、22種KIR基因型，21種單體型，其中A單體型有3種，B單體型有18種；KIR基因型的單體型組合方式：基因型3、4、5各有5種，基因型1、7、68有4種，基因型6、9、70、188各有3種，基因型2、8各有2種，其余基因型各有1種單體型組合方式。四川漢族和彝族有12種相同的基因型，9種相同的單體型。在四川彝族家系中發(fā)現(xiàn)了2種較為獨特的單體型，1種是含有3DP1變異體的A單體型，1種是缺失結(jié)構(gòu)基因3DP1的B單體型。從所得到的單體型的結(jié)構(gòu)

4、上看，除了缺失了3DP1的單體型以外，其余單體型的著絲粒端由KIR3DL3、2DS2、2DL2、2DL3、2DP1、2DL1和3DP1組成，并按從頭到尾的順序排列組合成了4種基本模式：3DL3-2DL3-2DP1-2DL1-3DP1,3DL3-2DS2-2DL2-3DP1v,3DL3-2DL3-3DP1v,3DL3-2DS2-2DL2-2DP1-2DL1-3DP1,而單體型的端粒端則由于可含有多種激活性KIR基因，而具有更加豐富的結(jié)構(gòu)模

5、式。
　　 結(jié)論：
　　 通過對四川漢族和彝族家系KIR單體型的分析，我們發(fā)現(xiàn)四川漢族和彝族家系的KIR單體型與白種人通過家系分析得到的KIR單體型不僅存在種類上的差異，且同一KIR基因型的KIR單體型組合方式也有所不同，在四川人群KIR單體型分析中，以四川人群家系分析獲得的KIR單體型數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)推導(dǎo)更為準(zhǔn)確。四川漢族和彝族家系KIR單體型基因組成具有以下規(guī)律：1）2DL1、2DP1總是和3DP1同時出現(xiàn)，2）有2DS1

6、時則2DS4缺失，反之亦然,3)2DS2總是和2DL2同時出現(xiàn)。熒光定量PCR技術(shù)可以定量測定個體攜帶的KIR基因的相對拷貝數(shù)，對于家系分析KIR單體型是一有益補充。
　　 第二部分，四川漢族人民KIR及其HLA配體的相互關(guān)系研究
　　 目的：
　　 了解殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(KIR)及其HLA配體在四川漢族人群中的基因頻率分布和配對情況，探討KIR和HLA的相互關(guān)系。
　　 方法：
　　 隨

7、機(jī)選擇從2008年12月到2009年10月間四川骨髓庫漢族街頭無關(guān)捐獻(xiàn)者標(biāo)本286份，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-序列特異性引物擴(kuò)增(PCR-SSP)進(jìn)行KIR基因分型；采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)．直接測序分型法(PCR-SBT)進(jìn)行HLA-A、B、C等位基因的測序分型。
　　 結(jié)果：
　　 在四川骨髓庫漢族人群中，所有個體均具有結(jié)構(gòu)基因3DL2、3DL3、2DL4和3DP1；共發(fā)現(xiàn)29種KIR基因型，其中基因型ID1和ID2頻率最高

8、，分別為47.55％(136/286)和14.69%(42/286)。HLA-C1和HLA-C2在該人群中的頻率分別為85.15%(487/572)和14.85%(85/572)；HLA-BBw4的頻率為31.99%(183/572)，HLA-ABw4的頻率是20.78%(119/572)。在該人群中，所有個體均含有抑制性KIR/HLA-C配受體對，含有1對、2對和3對配受體對的頻率分別是77.27%(211/286)，15.04%(4

9、3/286)，7.69%(22/286)。在KIR/HLA-Bw4配受體對中，僅含有3DL1+HLA-Bw4的頻率為44.76%(128/286)，僅含有3DS1+HLA-Bw4的頻率為2.80%(8/286)，同時含有3DL1+HLA-Bw4和3DS1+HLA-Bw4的配受體對的頻率為25.17%(72/286)，另外有27.27%(78/286)的個體無KIR/HLA-Bw4配受體對。
　　 結(jié)論：
　　 四川骨髓庫