海洋真菌BY1次級代謝產(chǎn)物的研究.pdf

1、海洋真菌為了適應(yīng)海洋特殊的環(huán)境（高鹽、高壓和寡營養(yǎng)等）會代謝產(chǎn)生具有特殊結(jié)構(gòu)和生物活性的化合物，這些活性化合物是現(xiàn)今新型藥物的重要來源。本論文對分離自福建省廈門市集美區(qū)紅樹植物海馬齒（Sesuvium portulacastrum）內(nèi)生真菌BY1進行形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定，對其發(fā)酵條件進行優(yōu)化，進一步對其次級代謝產(chǎn)物進行分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定和生物活性（抗菌和抗氧化）研究。主要實驗結(jié)果如下:
　　(1)菌株BY1的菌落形態(tài)和顯微形態(tài)與

2、曲霉屬中矮棒曲霉的典型形態(tài)特征相符，其28SrDNA序列也顯示與矮棒曲霉Aspergillus clavatonanicus（登錄號為AF459727.1）的相似度達100％，因此將菌株BY1鑒定為矮棒曲霉（Aspergillus clavatonanicus）。
　　(2)應(yīng)用不同發(fā)酵培養(yǎng)基，采用不同培養(yǎng)條件（培養(yǎng)天數(shù)、海水濃度、裝液量）對菌株BY1的發(fā)酵條件進行優(yōu)化，綜合考慮不同培養(yǎng)基和不同培養(yǎng)條件下的生物量、代謝產(chǎn)物量、抑菌

3、和抗氧化活性，確定BY1的發(fā)酵條件為:40％海水濃度MA液體培養(yǎng)基，裝液量100mL/250 mL，培養(yǎng)溫度28℃，190rpm搖床中培養(yǎng)9d。
　　(3)應(yīng)用硅膠柱層析、反相硅膠柱層析、PTLC、Sephadex LH-20等方法從菌株BY1次級代謝產(chǎn)物中分離純化得到7個化合物;應(yīng)用NMR和質(zhì)譜對化合物進行結(jié)構(gòu)解析，確定了化合物C1、B-11-2和D5-1的結(jié)構(gòu)，分別為伸筋草醇、大黃素-1-甲醚和3-羥甲基苯酚，并且化合物B-1

4、1-2為首次從紅樹林真菌中分離得到;同時通過HPLC法測定了化合物C1在MA培養(yǎng)基中的產(chǎn)量為82.8 mg/L。對純化得到的7個化合物進行抑菌和抗氧化活性測定，結(jié)果表明，化合物C1對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌具有較強的抑制作用，當(dāng)濃度為100μg/mL時，其Iz分別為（9.7±0.8）mm和（13.6±6.4）mm;化合物D7-1、B-11-2和E10對ABTS+自由基的清除能力較強，EC50值分別為(21.25±5.26)μg/mL、（