白芥子揮發(fā)油抗腫瘤作用初步研究.pdf

1、本文闡述了異硫氰酸鹽（ITCs）的來(lái)源、種類、理化性質(zhì)、防癌抗癌研究概況以及ITCs的一些其它作用。進(jìn)行了白芥子揮發(fā)油提取工藝的優(yōu)化，并對(duì)其化學(xué)成份進(jìn)行鑒定；觀察白芥子揮發(fā)油對(duì)肝癌H22細(xì)胞以及小鼠肝癌H22移植性腫瘤的抑制作用，并初步探究其作用機(jī)制，為白芥子揮發(fā)油的開發(fā)利用提供新的思路。
　　 本文以L9（34）正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)優(yōu)化白芥子揮發(fā)油的提取工藝，并通過(guò)GC-MS氣質(zhì)聯(lián)用法分析其化學(xué)成份；采用臺(tái)盼藍(lán)染色排染法以及MTT法檢

2、測(cè)白芥子揮發(fā)油對(duì)小鼠肝癌H22細(xì)胞的體外抑制作用，采用DNA瓊脂糖凝膠電泳法以及流式細(xì)胞儀PI單染法檢測(cè)白芥子揮發(fā)油對(duì)H22細(xì)胞凋亡與細(xì)胞周期的影響；通過(guò)建立小鼠肝癌H22腹水瘤模型和實(shí)體瘤模型觀察白芥子揮發(fā)油對(duì)小鼠肝癌H22的體內(nèi)抑制作用，并通過(guò)HE染色法觀察細(xì)胞形態(tài)的變化，檢測(cè)胸腺、脾臟指數(shù)探究白芥子揮發(fā)油的毒副作用，并采用丫啶橙染色觀察腫瘤細(xì)胞凋亡的特征，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)白芥子揮發(fā)油對(duì)小鼠肝癌H22實(shí)體瘤凋亡基因Bax、B

3、cl-2表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果表明白芥子揮發(fā)油最佳提取條件為：水解溫度50℃、緩沖液pH值為5.0、抗壞血酸濃度為0.5mmol/L，揮發(fā)油提取率可達(dá)0.164％，所提取揮發(fā)油主要成份為異硫氰酸烯丙酯（89.411％）；白芥子揮發(fā)油在體外對(duì)小鼠肝癌H22細(xì)胞的生長(zhǎng)有顯著的抑制作用，其抑制作用可能是通過(guò)細(xì)胞凋亡來(lái)實(shí)現(xiàn)；白芥子揮發(fā)油對(duì)小鼠肝癌H22腹水型小鼠具有一定的生命延長(zhǎng)作用，且對(duì)小鼠肝癌H22實(shí)體瘤也有著顯著的抑制作用，呈現(xiàn)