孕婦mtDNA A1555G突變位點(diǎn)的篩查.pdf

1、背景:聽力損傷是最常見的感覺器官障礙之一，在新生兒中的發(fā)病率為1‰，50％的耳聾患者是由遺傳因素引起的，其中約有1％的患者是由線粒體基因突變引起。線粒體基因突變可以導(dǎo)致個體對致聾環(huán)境因素易感性增加，其中以對氨基糖甙類抗生素易感性增加的線粒體DNA12SrRNA基因上的A1555G突變最為常見。該突變位點(diǎn)攜帶者在沒有使用氨基糖甙類抗生素時可以表現(xiàn)為正常聽力，在使用氨基糖甙類抗生素之后表現(xiàn)為對此類藥物敏感性增加，導(dǎo)致患者在使用正常劑量甚至微

2、小劑量的藥物時就可以發(fā)生重度甚至極重度的聽力損失。所以在孕婦中進(jìn)行mtDNAA1555G突變位點(diǎn)的篩查具有重要的意義。
　　目的:通過對孕婦mtDNAA1555G突變位點(diǎn)的篩查，評估A1555G突變在孕婦中的攜帶頻率，為在我國孕婦中進(jìn)行氨基糖甙類抗生素致聾相關(guān)的線粒體基因突變位點(diǎn)的篩查提供依據(jù)，對篩查陽性的孕婦檢測胎兒羊水細(xì)胞線粒體A1555G突變情況，確定胎兒基因型，為其今后用藥提供臨床指導(dǎo)。
　　方法:對2009年到20

3、10年來天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院做產(chǎn)前檢查的520名孕婦進(jìn)行線粒體DNA12SrRNA基因上的1555位點(diǎn)突變情況進(jìn)行檢測：應(yīng)用酚-氯仿法提取全血DNA，PCR擴(kuò)增目的片段，限制性內(nèi)切酶酶切擴(kuò)增產(chǎn)物，對酶切陽性的產(chǎn)物直接測序，測序結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)線粒體DNA序列比較。對篩查陽性的患者在B超引導(dǎo)下行羊膜腔穿刺抽取羊水提取胎兒DNA，進(jìn)行A1555G突變位點(diǎn)的檢測，確定胎兒基因型。
　　結(jié)果:520名受檢孕婦中有2名孕婦的PCR-酶切產(chǎn)物提示擴(kuò)

4、增目的片段酶切位點(diǎn)消失，酶切產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳顯示741bp一條帶，PCR產(chǎn)物直接測序證實(shí)2名孕婦為A1555G同質(zhì)性突變攜帶者，孕婦中A1555G突變攜帶者檢出率為0.38％，均為同質(zhì)性突變，低于我國正常人群中0.7％的突變攜帶率，經(jīng)胎兒羊水細(xì)胞mtDNA檢測發(fā)現(xiàn)胎兒基因型與母親基因型完全相同。
　　結(jié)論:1.本研究通過對孕婦mtDNAA1555G位點(diǎn)突變的篩查在國內(nèi)首次得出該位點(diǎn)突變的攜帶頻率，且均為同質(zhì)性突變，填補(bǔ)了該領(lǐng)域研