椎板切除術(shù)后脊柱的不穩(wěn)對(duì)硬膜外瘢痕形成的影響和預(yù)防的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:分析比較椎板切除術(shù)后脊柱的不穩(wěn)是否是影響硬膜外瘢痕形成的重要原因以及椎板切除術(shù)后鋼絲固定與自體移植脂肪對(duì)硬脊膜外瘢痕形成的影響.方法:SD大鼠128只,隨機(jī)分為16小組,每組8只,行L3全椎板切除,分別為棘突間鋼絲固定與移植脂肪組(IF組),單純鋼絲固定組(I組),移植脂肪組(F組)及對(duì)照組(C組).術(shù)后2、4、6、8周處死動(dòng)物,分別大體觀察.觀察評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)采用Rydell大體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn).瘢痕面積測(cè)定:取Masson三色法染色切片每組

2、8張,共128枚,用American image-proplus計(jì)算機(jī)圖象分析系統(tǒng)對(duì)病理切片中瘢痕面積進(jìn)行測(cè)量.硬膜外側(cè)瘢痕的測(cè)量范圍:自硬膜后緣向后1/2個(gè)椎管前后徑處劃一水平線,測(cè)量該線前方的所有瘢痕面積,將每張切片的瘢痕面積相加求值后除以椎間盤的面積,即為該標(biāo)本的瘢痕面積指數(shù).成纖維細(xì)胞及炎性細(xì)胞的測(cè)定:HE染色組織切片取同一放大率的瘢痕組織圖像(640x),直接輸入計(jì)算機(jī),在顯示器上用鼠標(biāo)器對(duì)成纖維細(xì)胞和炎性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù).為了減

3、少誤差,每標(biāo)本計(jì)數(shù)3個(gè)不同的視野,一個(gè)位于中央,兩個(gè)位于邊緣.且由一位不知實(shí)驗(yàn)過程及實(shí)驗(yàn)原理的病理醫(yī)師計(jì)數(shù).免疫組化方法:病理組織切片以CD34單克隆抗體作為第一抗體,按照免疫組織化學(xué)SP步驟進(jìn)行,DAB顯色,蘇木素復(fù)染,每組用0.01mmol/l的PBS液替代CD34抗體作陰性對(duì)照(試劑購(gòu)自于武漢博士德公司),應(yīng)用免疫組化顯示血管,對(duì)不同時(shí)期的血管生成情況及早期的炎性反映情況進(jìn)行觀察.生化定量膠原蛋白含量檢查:應(yīng)用許志勤<'[2]>等