不同方法處理牛心包的體外力學(xué)和抗鈣化性能評(píng)價(jià).pdf

1、目的：比較傳統(tǒng)戊二醛法(A組)、三氯化鋁與乙醇聯(lián)合處理法(B組)、環(huán)氧化物處理法(C組)和光氧化法(D組)四種不同方法處理牛心包后力學(xué)與抗鈣化性能比較。 方法：取牛心前區(qū)完整較平整區(qū)20塊，每一塊心包配對(duì)裁取4片，隨機(jī)分組，每組20片，A組：用含0.625％戊二醛的HEPES緩沖液(0.05 M，pH 7.4)，固定24 h，0.3％戊二醛的HEPES液，4℃冰箱保存?zhèn)溆?。B組：用含0.625％戊二醛的HEPES緩沖液(0.05

2、 M，pH 7.4)，固定24 h，在0.1 mol/l的三氯化鋁中處理45 min，放人80％乙醇液中，放入25℃恒溫水浴箱。C組：應(yīng)用4％乙二醇二縮水甘油醚溶液(pH 10.5)處理3d，保存于于50％酒精中備用。D組：高滲透壓PBS液(pH:7.6;0sm:680 mosm)中浸泡4 h，再置于含0.1％亞甲基藍(lán)的PBS液(pH:7.6:0sm:320mosm)中平衡4 h后，500 W白熾燈照射48 h。用4種方法處理后，測(cè)定組

3、織的極限抗張強(qiáng)度、斷裂伸長(zhǎng)率、熱皺縮溫度，比較其力學(xué)性能；建立大鼠皮下植入模型，包埋2月后取出標(biāo)本，肉眼觀察，原子吸收火焰法測(cè)4組心包試片鈣含量，每組送2個(gè)標(biāo)本HE染色及鈣染色。 結(jié)果：極限抗張強(qiáng)度：A組(17.35±1.71MN/M2)、B組(21.27±1.53MN/M2)、C組(17.77±1.19MN/M2)、D組(11.66±0.66MN/M2)：斷裂伸長(zhǎng)率：A組(34.16±2.08％)、B組(42.37±1.48％

4、)、C組(51.60±3.18％)、D組(48.78±3.43％) (n=20)；熱皺縮溫度：A組(88.86±0.58℃)、B組(86.41±0.85℃)、C組(80.43±1.02℃)、D組(73.96±0.66℃)(n=10)。鈣含量測(cè)定：A組(96.82±7.08 μg/mg)、B組(17.96±7.87μg/mg)、C組(29.59±3.18μg/mg)、D組(2.26±0.34 μg/mg)。組織學(xué)HE染色結(jié)果可以看到A組大

5、量膠原溶解變性，無(wú)細(xì)胞核存在；B組僅有輕微膠原溶解，無(wú)細(xì)胞核存在；C組與D組相似，膠原成分保留較完整，組織結(jié)構(gòu)基本完整，C有少量細(xì)胞核存在，D有明顯細(xì)胞浸。不同處理牛心包VONKOSSA’S染色可以看到A組大量黑色鈣鹽沉積，鈣化明顯；B組僅有輕微黑色鈣鹽，成條索狀；C組中可見(jiàn)一塊狀鈣鹽沉積；D組中沒(méi)有見(jiàn)到明顯鈣化組織。 結(jié)論：三氯化鋁與乙醇聯(lián)合處理組的組織交聯(lián)程度與力學(xué)強(qiáng)度最佳，光氧化處理組與多聚環(huán)氧化物(簡(jiǎn)稱PC)處理組的組織