菜芙蓉中黃酮的提取及檢測方法的研究.pdf

1、菜芙蓉的花、莖、葉、種子中,都含有豐富的生物活性物質(zhì),本文主要對菜芙蓉種子、花以及莖中黃酮提取方法進行了研究并開發(fā)出了兩種熒光分析方法和一種高效液相色譜分析方法,從而對菜芙蓉中黃酮的單體蘆丁和槲皮素的含量進行了檢測。
　　 本文主要以菜芙蓉的種子、花、莖為原料,采用傳統(tǒng)的乙醇浸提法,提取菜芙蓉中的總黃酮；并以蘆丁為對照品制作標準曲線,運用硝酸鋁比色法測定總黃酮的含量。通過單因素試驗方法,確定乙醇濃度、浸提時間、浸提溫度、液料比四

2、種因素的提取條件；根據(jù)二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計原理,在單因素試驗的基礎(chǔ)上采用四因素五水平的響應曲面分析方法進行試驗設(shè)計；同時通過響應曲面的回歸分析方法,將因子(乙醇濃度、浸提時間、浸提溫度、液料比)與響應值(提取率)的相互關(guān)系用多項式擬合,把因子和響應值的關(guān)系函數(shù)化,通過對函數(shù)的面進行分析,研究因子與響應值之間、因子與因子之間的相互關(guān)系,并進行優(yōu)化,從而獲得最優(yōu)的工藝參數(shù),提高了菜芙蓉樣品中黃酮的提取率。最終利用模型的響應曲面圖及其等高

3、線圖,得到的優(yōu)化工藝參數(shù)為:乙醇濃度為53.9％、浸提時間為2.2h、浸提溫度為76.9℃、液料比為22.3mL·g-1時提取效果最佳,黃酮提取率高達3.6％。
　　 鑒于植物體內(nèi)含有豐富的蘆丁和槲皮素物質(zhì),尤其這兩種化合物在生物、醫(yī)學領(lǐng)域的廣泛運用,本文根據(jù)蘆丁和槲皮素中特有的烯醇式的羥基或羧基結(jié)構(gòu)能與金屬離子形成π建共扼體系,形成具有靈敏度高、檢測限低的具有很強的熒光性化合物的性質(zhì),分別研究了蘆丁-鐵氰化鉀-硼砂體系和槲皮素

4、-Al3+體系熒光光度法進行測定菜芙蓉中的蘆丁或槲皮素的含量,分析各體系的熒光性質(zhì)及影響因素,通過各體系的精密度和回收率試驗,開發(fā)了關(guān)于菜芙蓉中的蘆丁和槲皮素的熒光檢測技術(shù)。
　　 為了進一步更準確地進行定性定量分析菜芙蓉中黃酮類物質(zhì),本文最后研究并開發(fā)了以蘆丁和槲皮素為標準物,采用C18反相色譜柱,二極管陣列檢測器高效液相色譜法分離分析菜芙蓉中的蘆丁和槲皮素的色譜分析方法,檢測結(jié)果進一步說明菜芙蓉中確實含有豐富的黃酮類物質(zhì),該