黃連素對(duì)脫氧膽酸誘導(dǎo)下人結(jié)腸癌細(xì)胞AP-1、COX-2表達(dá)的影響.pdf

1、目的研究脫氧膽酸(DCA)對(duì)HT-29人結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的作用及黃連素(BER) 對(duì)DCA誘導(dǎo)下HT-29細(xì)胞激活蛋白-1(AP-1)、環(huán)氧合酶-2(COX-2)表達(dá)的影響。探討B(tài)ER治療結(jié)直腸癌(CRC)的作用機(jī)制。 方法不同濃度DCA作用6、12、24、48小時(shí)以誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞增殖，同時(shí)以不同濃度BER作用相應(yīng)時(shí)間進(jìn)行干預(yù)。采用MTF法測(cè)定細(xì)胞增殖率和抑制率,細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)AP-1的表達(dá)；Western blot

2、檢測(cè)COX-2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果短時(shí)間、低劑量DCA能促進(jìn)HT-29細(xì)胞增殖；反之，長(zhǎng)時(shí)間、高劑量DCA能抑制其增殖，甚至完全表現(xiàn)為抑制作用。DCA能上調(diào)AP-1(c-Jun、c-Fos)蛋白及COX-2蛋白表達(dá)，呈濃度依賴性。BER對(duì)DCA誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞增殖有 抑制作用，且呈時(shí)間和劑量依賴性，隨著BER濃度的增高，作用時(shí)間的延長(zhǎng)細(xì)胞抑制率增加。BER能夠下調(diào)DCA誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞的AP-1蛋白及COX-2蛋白表達(dá)，

3、且呈濃度依賴性，隨著BER濃度的增高，AP-1蛋白及COX-2蛋白表達(dá)下降。在相同濃度DCA、BER作用相同時(shí)間的前提下，HT-29細(xì)胞增殖 AP-1及COX-2蛋白表達(dá)的變化趨勢(shì)基本相同。 結(jié)論DCA可能通過(guò)上調(diào)AP-1表達(dá)，進(jìn)一步使COX-2表達(dá)增加，從而促進(jìn)HT-29人結(jié)腸癌細(xì)胞增殖。反之，BER可能通過(guò)下調(diào)AP-1表達(dá)，進(jìn)一步使COX-2表達(dá)降低，從而抑制DCA誘導(dǎo)的HT-29細(xì)胞增殖。AP-1及COX-2可能成為 CR