腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MTA1在小鼠附睪中的表達及功能研究.pdf

1、侵襲和轉(zhuǎn)移是導致各種惡性腫瘤患者死亡的主要原因，并受多種基因的調(diào)控。近年來，已相繼克隆出許多與腫瘤轉(zhuǎn)移直接相關(guān)的“腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因”，其中有Yasushi Toh等從鼠和人類乳腺癌轉(zhuǎn)移細胞系中篩選克隆出腫瘤候選基因MTA1(metastasis associated gene 1，腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1)。腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因(MTA)是一個基因家族，現(xiàn)已確認3類(MTA1,MTA2,MTA3)及6個亞型(MTA1,MTA1s,MTA1-ZG2

2、9p,MTA2,MTA3,MTA3L)，其中MTA1,MTA2,MTA3均被認為是細胞核小體重構(gòu)和脫乙?；?NuRD)復合物的組成部分，它們通過影響染色質(zhì)的狀態(tài)來調(diào)整DNA復制，調(diào)控組蛋白乙?；癄顟B(tài)從而發(fā)揮生物學功能。
　　研究表明，MTA1與人類許多惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移過程緊密相關(guān)，在乳腺癌、卵巢癌、胃腸腫瘤、前列腺癌和食管癌等腫瘤細胞中都呈過表達。MTA1在NuRD復合物中與組蛋白去乙?；?(HDAC1)結(jié)合緊密，與組蛋白去乙

3、?；烧嚓P(guān)，作為組蛋白去乙?；傅妮o助激動因子抑制轉(zhuǎn)錄，成為轉(zhuǎn)錄過程中一個輔助抑制因子。Mazumdar等報道，雌激素受體(ER)陽性的乳腺細胞中hereglutin／HER2信號傳導通路的激活可刺激MTA1的表達，MTA1結(jié)合于ER的AF2(ER的一個配體結(jié)合位點)，同時MTA1與HDAC2結(jié)合，使HDAC2募集于含ER反應元件的啟動子附近，進而組蛋白去乙?；黾樱勾萍に厥荏w作用元件激活的基因轉(zhuǎn)錄受阻，使乳腺癌發(fā)展成更具侵襲特性的

4、惡性表型。MTA1作為組蛋白修飾物，在不同腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中都發(fā)揮了不同程度的促進作用。
　　目前，國內(nèi)外對MTA1的研究大部分著眼于其在腫瘤轉(zhuǎn)移過程的作用機理，而其生理功能的研究甚少。研究表明，MTA1不僅在腫瘤細胞中過表達，在哺乳動物正常細胞組織中也有表達，尤其是睪丸與胸腺組織，提示MTA1可能在這兩種組織發(fā)育過程中起到了更為重要的作用。為了更好的理解這一組蛋白修飾物的生理作用，我們前期觀察了MTA1在人、鼠睪丸發(fā)育過程中

5、的表達，揭示了它在精子發(fā)生減數(shù)分裂階段起了基因修飾的關(guān)鍵作用。
　　眾所周之，精子在附睪內(nèi)移行并逐漸成熟的過程是其獲得運動能力和受精能力的保證，而這一過程同樣受到雄激素的調(diào)控。鑒于MTA1在精子發(fā)生過程中的重要作用，我們研究它在附睪中不同部位不同細胞類型的表達定位，分析它在精子成熟、運輸和儲存過程的作用，并深入探討了雄激素對MTA1的調(diào)控作用機制，進一步明確它在生殖系統(tǒng)中表達的生理意義。本實驗分為四部分：
　　第一部分：MT

6、A1在正常成年小鼠組織中的表達。
　　第二部分：MTA1在正常小鼠附睪中的表達與定位。
　　第三部分：MTA1在小鼠生后不同發(fā)育階段附睪中的表達。
　　第四部分：建立去勢模型分析雄激素對MTA1的調(diào)控作用。
　　本實驗觀察了MTA1在正常成年小鼠各組織中的表達譜，結(jié)果顯示MTA1廣泛表達于小鼠各類組織器官，提示MTA1在多系統(tǒng)多器官的生理功能調(diào)節(jié)中發(fā)揮了重要的基因修飾作用。同時，我們揭示這一新的分子在附睪上皮細胞