青蒿琥酯與克林霉素聯(lián)用延緩惡性瘧抗藥性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、1.目的 1．1觀察實(shí)驗(yàn)組（青蒿琥酯與克林霉素聯(lián)合用藥）與對(duì)照組（單一用青蒿琥酯）在延緩惡性瘧原蟲對(duì)青蒿素類藥物抗藥性方面的作用，為瘧疾臨床治療用藥及抗瘧藥的研發(fā)提供參考。 1．2體外測定不同階段實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組惡性瘧原蟲對(duì)青蒿琥酯的敏感性，計(jì)算半數(shù)抑制量（ID50）。 1．3對(duì)不同階段實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組惡性瘧原蟲對(duì)青蒿琥酯的敏感性（ID50）進(jìn)行對(duì)比研究。 1．4探討聯(lián)合用藥是否有增效和延緩惡性瘧原蟲抗性的作

2、用，為瘧疾的臨床治療提出新的聯(lián)用方案。 2.方法 2．1蟲株與培養(yǎng)：惡性瘧原蟲抗青蒿琥酯株（品系），參照Trager等方法進(jìn)行體外連續(xù)培養(yǎng)。 2．2藥物作用觀察：用體外劑量遞增間隔接觸法進(jìn)行抗性培育。 2．3體外測定：測試采用Rieckmann體外微量測定法。以測定板的對(duì)照#為基數(shù)，計(jì)算各濃度#中的裂殖體抑制率，用ICEstimator software計(jì)算ID50。 2．4判別標(biāo)準(zhǔn) 惡性

3、瘧原蟲對(duì)青蒿琥酯的ID50較親代上升5倍以上，可以認(rèn)為對(duì)該藥產(chǎn)生了抗藥性，相應(yīng)的惡性瘧原蟲稱為惡性瘧原蟲青蒿琥酯抗性株。在相同的搞性培育時(shí)間內(nèi)，青蒿琥酯/克林霉素對(duì)惡性瘧原蟲的ID50分別較親代上升5倍，可以認(rèn)為對(duì)該藥產(chǎn)生了抗性；青蒿琥酯/克林霉素對(duì)惡性瘧原蟲的ID50分別與親代相比，無明顯上升或者雖然有上升，但明顯低于對(duì)照組，可以認(rèn)為該聯(lián)合用藥有延緩作用。 3.結(jié)果 3．1對(duì)照組惡性瘧原蟲接觸青蒿琥酯前后的敏感性測定結(jié)

4、果 對(duì)照組瘧原蟲在接觸青蒿琥酯后90天對(duì)青蒿琥酯的ID50為接觸藥物前的19．0（273．8/14．4）倍，停藥后30天的1．8（273．8/155．8）倍，停藥后30天的ID50為接觸藥物前的10．8（155．8/14．4）倍；對(duì)克林霉素的ID50為接觸藥物前的1．7（24815．2/14610．4）倍，停藥后30天的1．2（24815．2/21543．2）倍，停藥后30天的ID50為接觸藥物前的1．5（21543．2/146

5、10．4）倍。 3．2實(shí)驗(yàn)組惡性瘧原蟲接觸青蒿琥酯/克林霉素前后的敏感性測定結(jié)果惡性瘧原蟲在接觸青蒿琥酯/克林霉素后90天，對(duì)青蒿琥酯的ID50為接觸藥物前的3．4（49．6/14．4）倍，停藥后30天的1．6（49．6/30．2）倍，停藥后30天的ID50為接觸藥物前的2．1（30．2/14．4）倍。對(duì)克林霉素的ID50為接觸藥物前的1．6（23859．4/14610．4）倍，停藥后30天的1．5（23859．4/15487．

6、4）倍，停藥后30天的ID50為接觸藥物前的1．1（15487．4/14610．4）倍。 3．3青蒿琥酯/克林霉素聯(lián)用與青蒿琥酯單用對(duì)惡性瘧原蟲作用的比較在惡性瘧原蟲未接觸藥物前，在青蒿琥酯測定板、克林霉素測定板和青蒿琥酯/克林霉素復(fù)合測定板中測定瘧原蟲的敏感性顯示，單一測定板中青蒿琥酯的ID50是復(fù)合測定板的2．3（14．4/6．4）倍；克林霉素的ID50是復(fù)合測定板的143．5（14610．4/101．8）倍。照組在接觸藥物

7、90天后，單一測定板中青蒿琥酯的ID50是復(fù)合測定板的5．5（273．80/50．2）倍；克林霉素的ID50是復(fù)合測定板的30．9（24815．2/803．2）倍。實(shí)驗(yàn)組在接觸藥物90天后，單一測定板中青蒿琥酯的ID50是復(fù)合測定板的0．5（49．6/99）倍；克林霉素的ID50是復(fù)合測定板的15．1（23859．40/1584．8）倍。 4.結(jié)論 4．1惡性瘧原蟲在單一接觸青蒿琥酯后一段時(shí)間可產(chǎn)生抗藥性，其ID50遠(yuǎn)遠(yuǎn)