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1、目的:通過觀察高原性肺動(dòng)脈高壓大鼠肺小動(dòng)脈形態(tài)學(xué)改變,檢測(cè)肺小動(dòng)脈管壁上內(nèi)皮素-1(ET-1)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)的表達(dá),旨在了解高原性肺動(dòng)脈高壓的形成機(jī)理,同時(shí)探討紅景天對(duì)大鼠高原性肺動(dòng)脈高壓的干預(yù)作用。
方法:雄性wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、低氧組和紅景天組,每組32只。對(duì)照組于成都(海拔500米)飼養(yǎng),低氧組和紅景天組于拉薩(海拔3700米)飼養(yǎng)。紅景天組給予24%紅
2、景天溶液灌胃10ml/(kg·d)。低氧組和對(duì)照組每天給予等容積生理鹽水灌胃。分別以實(shí)驗(yàn)開始后10天、20天、30天、40天作為檢測(cè)點(diǎn),三組大鼠均隨機(jī)選取8只,進(jìn)行如下處理:(1)右心導(dǎo)管漂浮法測(cè)量大鼠平均肺動(dòng)脈壓(mPAP);(2)稱量大鼠右心室(RV)和左心室(LV)加室間隔(S)的重量,以RV/(LV+S)比值反映右心室肥厚程度;(3)光鏡下觀察大鼠肺小動(dòng)脈形態(tài)學(xué)改變,結(jié)合圖像分析軟件測(cè)量管壁厚度與血管外徑之比(WT%);(4)電
3、鏡下觀察大鼠肺小動(dòng)脈管壁超微結(jié)構(gòu)改變;(5)免疫組化法觀察大鼠肺小動(dòng)脈管壁上ET-1、VEGF以及TGF-β1的表達(dá)變化,并用圖像分析軟件測(cè)取光密度(optical deinsity,OD)值。
結(jié)果:1.低氧組各檢測(cè)點(diǎn)mPAP均較對(duì)照組增高(P均<0.05);紅景天組10天檢測(cè)點(diǎn)mPAP與低氧組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),紅景天組20天、30天和40天檢測(cè)點(diǎn)mPAP均低于與低氧組(P均<0.05)。
4、 2.低氧組各檢測(cè)點(diǎn)RV/(LV+S)均較對(duì)照組增高(P均<0.05);紅景天組10天檢測(cè)點(diǎn)RV/(LV+S)與低氧組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),紅景天組20天、30天和40天檢測(cè)點(diǎn)RV/(LV+S)均低于與低氧組(P均<0.05)。
3.低氧組各檢測(cè)點(diǎn)WT%均較對(duì)照組增高(P均<0.05);紅景天組10天檢測(cè)點(diǎn)WT%與低氧組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),紅景天組20天、30天和40天檢測(cè)點(diǎn)W T
5、%均低于與低氧組(P均<0.05)。
4.大鼠肺小動(dòng)脈超微結(jié)構(gòu)觀察:對(duì)照組大鼠肺小動(dòng)脈如常。低氧組大鼠肺小動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞增生、變性;內(nèi)彈力膜厚薄不均;平滑肌細(xì)胞增生;膠原原纖維增多;肺小動(dòng)脈肌化。紅景天組大鼠肺小動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞增生等病變較低氧組減輕。
5.(1)低氧組各檢測(cè)點(diǎn)ET-1的OD值均較對(duì)照組增高(P均<0.05);紅景天組10天檢測(cè)點(diǎn)ET-1的OD值與低氧組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.0
6、5),紅景天組20天、30天和40天檢測(cè)點(diǎn)ET-1的OD值均低于與低氧組(P均<0.05)。
(2)低氧組各檢測(cè)點(diǎn)VEGF的OD值均較對(duì)照組增高(P均<0.05);紅景天組10天檢測(cè)點(diǎn)VEGF的OD值與低氧組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),紅景天組20天、30天和40天檢測(cè)點(diǎn)VEGF的OD值均低于與低氧組(P均<0.05)。
(3)TGF-β1的OD值:低氧組各檢測(cè)點(diǎn)TGF-β1的OD值均較對(duì)照組增高
7、(P均<0.05);紅景天組10天檢測(cè)點(diǎn)TGF-β1的OD值與低氧組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),紅景天組20天、30天和40天檢測(cè)點(diǎn)TGF-β1的OD值均低于與低氧組(P均<0.05)。
結(jié)論:1.低壓低氧引起大鼠平均肺動(dòng)脈壓升高,肺小動(dòng)脈管壁增厚,形成高原性肺動(dòng)脈高壓的病理基礎(chǔ)。
2.低壓低氧引起大鼠肺小動(dòng)脈ET-1、VEGF及TGF-β1表達(dá)升高,致使肺血管發(fā)生低氧性收縮及肺血管重建。
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