肌肉注射人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)阿霉素?cái)U(kuò)張型心肌病大鼠心肌微血管新生的影響.pdf

1、目的：探討經(jīng)肌肉注射途徑移植人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（hUC-MSCs）對(duì)阿霉素?cái)U(kuò)張型心肌病大鼠的治療效應(yīng)及對(duì)心肌微血管再生的影響。
　　方法：100只SPF級(jí)健康SD大鼠隨機(jī)分為2組：正常對(duì)照組（15只）和擴(kuò)張型心肌病組（簡(jiǎn)稱DCM組，85只）。DCM組大鼠采用2mg/kg阿霉素每周1次，連續(xù)8周建立擴(kuò)張型心肌病模型。模型建立成功2周后，成活的60只大鼠隨機(jī)分為DCM模型對(duì)照組（DMEM組，2ml DMEM）；hUC-MSCs低劑量組

2、（低劑量組，1×106 hUC-MSCs）；hUC-MSCs高劑量組（高劑量組10×106 hUC-MSCs）。干細(xì)胞治療4周后，心臟超聲評(píng)估大鼠心功能；酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法（EIA）檢測(cè)血漿 BNP水平；免疫組化標(biāo)記 CD34檢測(cè)心肌微血管密度以及電鏡觀察微血管結(jié)構(gòu)；實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)心肌Slit-2、Robo-1與Robo-4表達(dá)水平，Western blot檢測(cè)心肌HGF、LIF及VEGF蛋白含量。
　　結(jié)果:在hUC-MSCs移

3、植4周后，心臟超聲提示低劑量組與高劑量組大鼠左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）與治療前對(duì)比明顯上升[(66.10±1.93)％至(72.27±2.44)%，P＜0.01；（66.31±2.97）%至（70.92±2.68）%，P＜0.01]；左室短縮率（LVFS）前后對(duì)比也出現(xiàn)上升[(31.00±1.71)%至(34.96±2.08)%，P＜0.05；(31.57±2.45)%至(33.49±2.19)%，P＜0.05)]； DMEM組大鼠LVE

4、F、LVFS均呈下降趨勢(shì)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。大鼠血漿 BNP水平明顯下降，低劑量組由(352.68±41.25) pg/ml至(202.68±20.38) pg/ml，P＜0.01；高劑量組由(355.79±48.32) pg/ml至(193.62±15.41) pg/ml，P＜0.01；DMEM組則繼續(xù)上升，由(365.42±61.81）pg/ml至（431.26±52.80） pg/ml，P＜0.05。低劑量組與高

5、劑量組大鼠心肌微血管密度與DMEM組對(duì)比也明顯增多[(84.00±19.18)/mm2與(86.67±20.88)/mm2比(27.14±13.97)/mm2，P＜0.01]，DMEM組與正常組大鼠對(duì)比無明顯差異[(27.14±13.9)/mm2 vs(16.43±5.71)/mm2，P＞0.05)]；給予不同劑量hUC-MSCs移植的大鼠電鏡下心肌微血管的損害程度均要輕于給予 DMEM注射的大鼠。與DMEM組大鼠對(duì)比給予 hUC-MS

6、C移植的大鼠心肌 Slit-2與 Robo-1的表達(dá)水平明顯升高；而 Robo-4在各組大鼠間表達(dá)水平均差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HGF、VEGF與LIF在低劑量組與高劑量組大鼠心肌含量均高于DMEM組（P＜0.01）。
　　結(jié)論：肌肉注射hUC-MSCs能夠明顯改善阿霉素誘導(dǎo)的DCM大鼠心臟功能；并且可以上調(diào) Slit-2、Robo-1、HGF、LIF與 VEFG在大鼠心肌中的表達(dá)促進(jìn)大鼠心肌微血管再生。hUC-MSCs可能通過旁分泌