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1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文電針對腦缺氧缺血新生大鼠海馬結(jié)構(gòu)Nestin、BrdU和GFAP表達(dá)的影響姓名:曾光偉申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):人體解剖與組織胚胎學(xué)指導(dǎo)教師:吳愛群湯善鈞20040425鄭州大學(xué)2004年碰士學(xué)位論文電針對腦缺氧缺血新生大鼠海馬結(jié)構(gòu)Nestln、Brdu和GFAP表選的影響(25只,存活23只):頸部正中切口,不結(jié)扎左側(cè)頸總動(dòng)脈,不做低氧處理。模型判定組(25只,存活20只)、缺氧缺血組(25只,存活22只)和缺氧缺血
2、后電針治療組(25只,存活24只),各組動(dòng)物分別結(jié)扎左側(cè)頸總動(dòng)脈,然后將動(dòng)物置于8%02—92N2混合氣中2h后取出。模型判定組動(dòng)物在缺氧缺血48h處死,制備腦片及腦組織切片,應(yīng)用TTC及HE染色判定模型是否成功。腦缺氧缺血后電針組在缺氧缺血后恢復(fù)2d,開始刺激“百會(huì)”和“大椎”兩穴。將針柄分別連接至電刺激儀的電極上(電針刺激參數(shù):頻率16Hz,強(qiáng)度10mV),留針10rain,治療2個(gè)療程,每個(gè)療程10cl,兩療程間間隔2d。24d后
3、除模型判定組外各組動(dòng)物分別灌注取左側(cè)腦組織,常規(guī)石蠟包埋、切片,行Nestin、Brdu和GFAP免疫組化染色,光鏡下觀察海馬結(jié)構(gòu)的陽性細(xì)胞分布、記數(shù)定量分析,采用SPSSl00軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果:1TTC組織化學(xué)染色:模型判定組動(dòng)物的腦片經(jīng)TTC功能性酶組織化學(xué)染色后,其左側(cè)大腦半球的大部分腦實(shí)質(zhì)著色淺呈蒼白色,而右側(cè)大腦半球染成深紅色,提示模型成功。21iE染色:模型組判定組動(dòng)物的左側(cè)大腦半球HE染色可見腦水腫和腦室及蛛
4、網(wǎng)膜下腔出血等病理改變;腦組織灶性溶解壞死,間質(zhì)及血管周圍明顯水腫,膠質(zhì)細(xì)胞增生:部分神經(jīng)元固縮、變性和壞死。3Nestin免疫組織化學(xué)染色:各組新生大鼠腦組織海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)的海馬CAl,CA2及CA3區(qū)和齒狀回等顯示出Nestin免疫陽性細(xì)胞分布。腦缺氧缺血組海馬CAl區(qū)Nestin免疫陽性細(xì)胞數(shù)(25721321)高于正常對照組(1986383,P005);腦缺氧缺血后電針組海馬CAl區(qū)Nestin免疫陽性細(xì)胞數(shù)(3085379)高于腦
5、缺氧缺血組(P005)。4Brdu免疫組織化學(xué)染色:Brdu免疫組織化學(xué)染色顯示各組Wistar幼鼠腦組織內(nèi)側(cè)腦室的室管膜下層、齒狀回顆粒細(xì)胞層的下層及胼胝體等顯示出Brdu免疫陽性細(xì)胞分布;腦缺氧缺血組齒狀回Brdu免疫陽性細(xì)胞數(shù)(1978286)高于正常對照組(1022_221,P005):腦缺氧缺血后電針組齒狀回Brdu免疫陽性細(xì)胞數(shù)(2404258)稍高于腦缺氧缺血組(P005)。4GFAP免疫組織化學(xué)染色:各組新生大鼠腦組織海
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