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1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文網(wǎng)膜成纖維細(xì)胞的活化及其促進卵巢癌網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移的機制研究姓名:唐慧娟申請學(xué)位級別:博士專業(yè):婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師:王澤華201105華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文第二部分第二部分網(wǎng)膜成纖維細(xì)胞的活化機制網(wǎng)膜成纖維細(xì)胞的活化機制目的目的探討網(wǎng)膜組織CAFs的來源及發(fā)生活化的機制。方法方法1.正常成纖維細(xì)胞(nmalfibroblasts,NFs)與EOC細(xì)胞株SKOV3OVCAR3CAOV3ES2共培養(yǎng)1
2、5天后,取NFs做PCR、Westernblot和免疫熒光,檢測αSMA的表達和SMAD2的磷酸化;用EdU增殖實驗檢測其增殖水平。2.用不同濃度的轉(zhuǎn)化生長因子β1(transfminggrowthfactβ1,TGFβ1)處理NFs2小時至2天后,取NFs做PCR、Westernblot檢測αSMA的表達和SMAD2的磷酸化水平;用EdU增殖實驗檢測其增殖水平。3.用TGFβ1受體抑制劑(A8301)處理NFs,再與SKOV3細(xì)胞共培
3、養(yǎng)或外源性TGFβ1處理,取NFs做PCR、Westernblot檢測αSMA的表達和SMAD2的磷酸化;用EdU增殖實驗檢測其增殖水平。結(jié)果結(jié)果1.與各種EOC細(xì)胞株共培養(yǎng)4天后,NFs中αSMA表達量均增加(P0.05),增殖細(xì)胞數(shù)增多(P0.05)。2.用TGFβ1處理NFs2天后,NFs表達αSMA增多,磷酸化SMAD2增多,并且有劑量依賴性(P0.001)。增殖細(xì)胞數(shù)也增多(P=0.002)。3.用A8301處理NFs可以減弱
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