活血通脈靈對(duì)異丙腎上腺素致心肌缺血大鼠的保護(hù)作用及VEGF、bFGF表達(dá)的影響.pdf

1、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(冠心病)，已成為威脅人類健康的最常見疾病之一，心肌缺血是該病基本的病理生理過程。中藥方劑活血通脈靈(HXTML)是以傳統(tǒng)氣血理論為基礎(chǔ)，經(jīng)多年實(shí)踐總結(jié)創(chuàng)新出來的具有防治冠心病心肌缺血作用的經(jīng)驗(yàn)方。經(jīng)臨床大量病例驗(yàn)證，對(duì)冠心病療效滿意。本研究采用血清學(xué)方法，放射免疫法，免疫組織化學(xué)法等研究方法，初步探討活血通脈靈的作用機(jī)制，為其進(jìn)一步推廣應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。 目的：探討活血通脈靈對(duì)異丙腎上腺素(ISO)所致

2、心肌缺血大鼠心肌損傷的保護(hù)作用機(jī)制。 方法：將50只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，藥物對(duì)照組及活血通脈靈大劑量治療組(HXTMLmax)和活血通脈靈小劑量治療組(HXTMLmin)，每組10只，實(shí)驗(yàn)前記錄肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖，檢測(cè)正常者可入選。空白組和模型組每次給予10ml/kg生理鹽水，藥物對(duì)照組給予腸溶阿斯匹林16.6mg/kg，用生理鹽水配成等體積混懸液，HXTMLmax組和HXTMLmin組分別給予含生

3、藥47g/kg，23.5g/kg湯劑，以上液體按10ml/kg灌胃，每日一次，連續(xù)14天，正常飲食。第12天起除空白組外，其余4組大鼠均皮下注射ISO5mg/kg，復(fù)制心肌缺血模型，空白組皮下注射等量生理鹽水，每日一次，連續(xù)3天。各組均在末次皮下注射后45分鐘用20％烏拉坦5ml/kg腹腔注射麻醉，用心電圖機(jī)標(biāo)記Ⅱ?qū)?lián)。然后斷頭取血，用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清心肌酶，即肌酸激酶(CK)，其同工酶(CK-MB)，乳酸脫氫酶(LDH)。通過

4、放射免疫法檢測(cè)血漿內(nèi)皮素(ET)，降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)。取心尖部心肌組織，進(jìn)行蘇木素-伊紅(HE)染色，光鏡下觀察病理形態(tài)學(xué)改變。并采用ABC染色檢測(cè)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)的表達(dá)量。根據(jù)Weidner法，每個(gè)標(biāo)本選兩張片，隨機(jī)選取10個(gè)400倍高倍視野，計(jì)數(shù)100個(gè)同類細(xì)胞的陽性細(xì)胞數(shù)。 結(jié)果：1心電圖改變與實(shí)驗(yàn)前所做心電圖相比，空白組心電圖ST段接近等電位線，T波無明顯降低。與

5、空白組比較，模型組ST段壓低及T波降低明顯(P＜0.01)，表明本次復(fù)制心肌缺血模型成功。與模型組比較，藥物對(duì)照組及各中藥治療組ST段及T波壓低較小(P＜0.05或P＜0.01)，三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 2血清心肌酶三項(xiàng)指標(biāo)中，模型組較空白組均顯著升高(P＜0.01)。與模型組比較，HXTMLmax組三項(xiàng)指標(biāo)均降低，兩組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；藥物對(duì)照組及HXTMLmin組三項(xiàng)指標(biāo)也有不同程度改善(

6、P＜0.01)。HXTMLmax組在降低LDH方面優(yōu)于以上兩組(P＜0.01)，在其余兩個(gè)指標(biāo)中三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 3血漿ET,CGRP3.1血漿ET模型組與空白組相比，ET水平升高(P＜0.01)。藥物對(duì)照組及兩個(gè)中藥治療組較模型組水平明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，其中HXTMLmax組較藥物對(duì)照組及HXTMLmin組更低(P＜0.05)。后兩組組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 3

7、.2血漿CGRP模型組與空白組相比，CGRP水平降低(P＜0.01)。與模型組比較，HXTMLmax組和HXTMLmin組CGRP水平較高(P＜0.01)，HXTMLmax組較HXTMLmin組更優(yōu)(P＜0.01)，藥物對(duì)照組與模型組間CGRP值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 4組織病理損傷空白對(duì)照組未見明顯的組織學(xué)改變；模型組以心肌大范圍灶性病變，肌纖維腫脹和斷裂，空泡變性，間質(zhì)水腫，炎細(xì)胞浸潤(rùn)為主；藥物對(duì)照組和HXTML

8、min組較模型組改變輕微，以肌纖維腫脹，局灶性斷裂，少量空泡變性和炎細(xì)胞浸潤(rùn)為主；HXTMLmax組的病理改變最輕，多為炎細(xì)胞浸潤(rùn)。 5VEGF,bFGF表達(dá)5.1VEGF表達(dá)空白對(duì)照組VEGF少量表達(dá)，其余各組均有不同程度表達(dá)，表達(dá)量較空白組高(P＜0.05或P＜0.01)。VEGF在HXTMLmax組表達(dá)量最高，HXTMLmin組次之，與模型組及藥物對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)，但兩組間差異無統(tǒng)計(jì)

9、學(xué)意義(P＞0.05)。藥物對(duì)照組表達(dá)量與模型組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 5.2bFGF表達(dá)空白對(duì)照組bFGF少量表達(dá)，其余各組均有不同程度表達(dá)，其中模型組與空白組相比表達(dá)量較高(P＜0.05)，其余各組表達(dá)量顯著增高(P＜0.01)。HXTMLmax組及HXTMLmin組表達(dá)量高于模型組及藥物對(duì)照組(P＜0.01)，但兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，藥物對(duì)照組表達(dá)量與模型組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)