加味四逆散防治慢性疲勞綜合征的免疫機(jī)制研究.pdf

1、　　目的：
　　本課題從加味四逆散治療慢性疲勞綜合征的免疫學(xué)研究入手,通過(guò)與帕羅西汀組、小柴胡湯組、柴胡龍骨牡蠣湯組、四物湯組、黃芪建中湯組、人參煎液組、牛膝組對(duì)照研究,以探討疏理氣機(jī)為主治療慢性疲勞綜合征的理論與實(shí)驗(yàn)依據(jù),探索加味四逆散防治慢性疲勞綜合征的免疫機(jī)制,從而為運(yùn)用疏理氣機(jī)的方法防治慢性疲勞綜合征提供可靠的參考依據(jù),同時(shí)研究結(jié)果對(duì)提高慢性疲勞綜合征的中西醫(yī)診治水平具有一定的意義。
　　方法：
　

2、　SPF級(jí)健康成年雌性 Wistar 大鼠 100 只,體重( 180±20) g,正常光照的清潔級(jí)動(dòng)物室中,對(duì)大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周,采用隨機(jī)數(shù)字法分組的方法,隨機(jī)分為10組,每組 10只,分為空白對(duì)照組、模型組、加味四逆散組、帕羅西汀組、小柴胡湯組、柴胡龍骨牡蠣湯組、四物湯組、黃芪建中湯組、人參煎液組、牛膝組。空白對(duì)照組大鼠每天定點(diǎn)喂食,不予任何應(yīng)激源刺激；對(duì)于其它各組大鼠進(jìn)行慢性中等強(qiáng)度的應(yīng)激 35 天,包括強(qiáng)迫游泳(19℃,水深 4

3、0cm,大鼠力竭為止),束縛(將大鼠放入自制的束縛瓶中,膠帶封閉瓶底,持續(xù) 5h)、剝奪睡眠 24h、禁水禁食、夾尾。各組大鼠每 7天稱(chēng)一次體重,每 7天以敞箱實(shí)驗(yàn)( Open-Fieldtest)法測(cè)定動(dòng)物行為學(xué)的變化,造成氣滯型慢性疲勞模型。隨后分別按帕羅西汀組以20mg鹽酸帕羅西汀片溶于 94ml生理鹽水中,加味四逆散組 5.93g/kg、小柴胡湯組 8.47g/kg、柴胡龍骨牡蠣湯組 7.41g/kg、四物湯組 4.23g/kg

4、、黃芪建中湯組10.48g/kg、人參煎液組 1.06g/kg、牛膝組 1.59g/kg,各組均按 1.0ml/100g體重給藥,空白對(duì)照組和模型組按 1.0ml/100g蒸餾水灌胃, 1次/天,共治療 21天,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于末次給藥后禁食,不禁水,次日取材。通過(guò)體重變化、敞箱實(shí)驗(yàn)等方法評(píng)價(jià)模型大鼠行為學(xué)指標(biāo)；采用酶聯(lián)免疫法( ELISA)測(cè)定大鼠血清 IgG和 IgM的量的變化；采用酶聯(lián)免疫法( ELISA)測(cè)定大鼠血清 TNF-α 和

5、TNF-β 的量的變化。
　　結(jié)果：
　　每組的結(jié)果與空白對(duì)照組相比,慢性疲勞模型組大鼠造模過(guò)程中體重降低,敞箱實(shí)驗(yàn)的大鼠的水平運(yùn)動(dòng)次數(shù)和垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)下降,大鼠血清 IgG 和 IgM 的含量明顯降低,大鼠血清 TNF-α 和 TNF-β 的含量明顯升高,經(jīng)治療后,加味四逆散治療組、帕羅西丁治療組以及小柴胡湯治療組可以升高大鼠血清 IgG和 IgM的含量,并可以降低大鼠血清 TNF-α和 TNF-β的含量。

6、>　　結(jié)論：
　?、俾圆豢深A(yù)見(jiàn)的中高等強(qiáng)度復(fù)合應(yīng)激能誘發(fā)大鼠的慢性疲勞狀態(tài)。
　　②慢性不可預(yù)見(jiàn)的中高等強(qiáng)度復(fù)合應(yīng)激誘發(fā)慢性疲勞狀態(tài)的機(jī)制可能與血清中 IgG和 IgM的含量的降低有關(guān),與血清中 TNF-α和 TNF-β的含量的升高有關(guān)。
　?、垡允枥須鈾C(jī)為主治療慢性疲勞慢性疲勞綜合征有效。
　?、苁枥須鈾C(jī)法治療慢性疲勞綜合征的機(jī)理可能與調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能有關(guān)；加味四逆散治療慢性疲勞綜合征的機(jī)理