漸危藥用植物秦艽產(chǎn)活性成分內(nèi)生真菌的初步研究.pdf

1、從秦艽根、莖、葉中共分離出20種內(nèi)生真菌。經(jīng)初步篩選，得到5株可能產(chǎn)秦艽主要成分龍膽苦苷的菌株QJ2、QJ8、QJ12、QJ16和QJ18。進(jìn)一步篩選發(fā)現(xiàn)，其中QJ18產(chǎn)龍膽苦苷能力較強(qiáng)，故以此作為供試菌株，對其做了以下的研究。 對龍膽苦苷的薄層層析檢測方法進(jìn)行了篩選，發(fā)現(xiàn)用乙酸乙酯：甲醇：水(20：2：1)作為展開劑，用碘熏蒸顯色是較為理想的檢測條件。 對QJ18菌株產(chǎn)生的龍膽苦苷的提取方法進(jìn)行了選擇和優(yōu)化，制備薄層是

2、提純的較理想方法。 薄層掃描等檢測結(jié)果顯示，QJ18提取物、龍膽苦苷標(biāo)準(zhǔn)品的紫外一可見光吸收曲線相似，都在254nm和270nm有吸收峰；高效液相結(jié)果表明QJ18提取物有一個峰的保留時間和龍膽苦苷標(biāo)準(zhǔn)品的基本相同。QJ18提取物紅外譜圖存在與龍膽苦苷結(jié)構(gòu)中官能團(tuán)相一致的特征峰。液質(zhì)聯(lián)用結(jié)果顯示QJ18提取物液相色譜圖中主峰和龍膽苦苷標(biāo)準(zhǔn)品保留時間一致，OJ18提取物液相色譜圖中主峰的質(zhì)譜圖與標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)譜圖一致。這些結(jié)果都表明內(nèi)生真

3、菌OJ18能夠產(chǎn)生和其宿主相同的龍膽苦苷成分。 利于龍膽苦苷產(chǎn)生的基本培養(yǎng)基以馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基為最佳。利用液體培養(yǎng)基對其中的碳、氮源進(jìn)行了篩選，結(jié)果顯示，對于QJ18菌絲生長和龍膽苦苷的產(chǎn)生來說，蔗糖和尿素是較理想的碳源和氮源。 通過正交實驗優(yōu)化了QJ18的發(fā)酵條件，得出適宜菌絲體生長的培養(yǎng)條件為：蔗糖30g·L<'-1>，尿素2g·L<'-1>，裝量為105ml/300ml，PH7.0左右，培養(yǎng)溫度28℃，震蕩速