沙棘體細(xì)胞胚途徑組織培養(yǎng)再生體系的研究.pdf

1、建立高效、穩(wěn)定的再生體系是果樹轉(zhuǎn)基因成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，為此，本研究以中國沙棘，俄羅斯大果沙棘為試驗(yàn)材料，就影響其植株再生的有關(guān)因子，包括植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類及濃度、暗培養(yǎng)時(shí)間、葉片極性、基本培養(yǎng)基、外植體類型、糖源種類及濃度等多方面進(jìn)行研究探討，建立了沙棘高效離體再生體系。主要結(jié)果如下： 1 中國沙棘誘導(dǎo)體胚發(fā)生以1/2B<'5>為基本培養(yǎng)基，附加30g/L蔗糖再生效果最好。田間葉片再生體胚的最適培養(yǎng)基為l/2B<'5>+6-BA3

2、.0mg/L+NAA0.1mg/L；試管苗葉片、體胚苗葉片再生體胚的最適培養(yǎng)基為l/2B<'5>+6-BA2.Omg/L+NAA0.1mg/L；子葉再生體胚最適培養(yǎng)基為l/28<'5>+6-BAO.5mg/L+NAA0.05rag/L。 2 暗試驗(yàn)結(jié)果表明，子葉接種后進(jìn)行一段時(shí)間的暗培養(yǎng)(2-3周)，可明顯提高沙棘子葉體胚再生率。 3 子葉極性試驗(yàn)結(jié)果表明，子葉近遠(yuǎn)軸端均可產(chǎn)生體胚，但近軸端再生率高于遠(yuǎn)軸端；體胚絕大多數(shù)