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文檔簡介
1、目的:研究LPS和TGF-β對小鼠脾臟樹突狀細(xì)胞(DC)功能的影響和兩者之間的關(guān)系,以及其作用的相關(guān)分子機(jī)制。
方法:利用流式細(xì)胞術(shù)檢測DC成熟表面標(biāo)記MHC-II類分子、CD80和CD86表達(dá)水平;應(yīng)用ELISA檢測DC分泌的主要促炎性細(xì)胞因子水平;Annexin V/PI凋亡檢測試劑盒測定DC凋亡;利用phos-flow技術(shù)檢測AKT和NF-κBp65的磷酸化水平;Real-time PCR驗(yàn)證基因芯片分析中變化差異明顯基
2、因的mRNA水平;利用DC-T共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),研究LPS和TGF-β對T細(xì)胞抗原特異性免疫反應(yīng)的影響。
結(jié)果:LPS處理DC,其表面共刺激分子MHC-II分子的表達(dá)水平不變,CD80和CD86表達(dá)水平顯著增加,促炎性細(xì)胞因子IL-6、IL-12p40、TNF-α的分泌和部分趨化因子的表達(dá)增加,小鼠脾臟DC的存活率顯著提高,與其共培養(yǎng)CD4+T細(xì)胞的增殖明顯增強(qiáng);TGF-β處理DC,其表面共刺激分子CD80和CD86以及部分趨化因子
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