太空育種對喜樹內(nèi)生真菌合成代謝及生長發(fā)育特性的影響.pdf

1、喜樹為山茱萸目珙桐科喬木植物,是我國特有的一種高大落葉喬木,廣泛分布于長江流域及西南各省區(qū)。1966年美國的Monroe E.Wall首次從喜樹莖的提取物中分離出喜樹堿,隨后人們研究發(fā)現(xiàn)喜樹堿對胃腸道腫瘤、膀胱癌、肝癌和白血病等惡性腫瘤均有一定療效。喜樹堿的獨特抗癌活性機制掀起了喜樹與喜樹堿研究的高潮。
　　 本文對湖南張家界喜樹開展了內(nèi)生真菌的分離、篩選和產(chǎn)物的抗癌特性研究。目的在于尋找更廣泛喜樹堿來源,獲得有效產(chǎn)生喜樹堿物質(zhì)

2、的目標新菌株,同時開發(fā)新的天然藥物,為解決喜樹堿生產(chǎn)中的一些關(guān)鍵問題和最終實現(xiàn)通過微生物工程生產(chǎn)該藥物奠定研究基礎(chǔ)。本文從湖南喜樹皮中分離得到內(nèi)生真菌,通過液體培養(yǎng)基發(fā)酵后,分離出15株喜樹菌株,用薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)進行檢測,發(fā)現(xiàn)其中一株的胞外分泌物中含有喜樹堿,標號EFC I-03,該菌株具有進一步研究的價值。
　　 對菌株EFC I-03進行了太空育種,研究太空育種對喜樹內(nèi)生真菌生理特性以及產(chǎn)喜

3、樹堿能力的影響。試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),接受太空誘變影響的第一代菌株具生長速度快的優(yōu)勢,但是這優(yōu)勢不具有可遺傳性,培養(yǎng)的第二、第三代太空菌株在生長速度上已經(jīng)和地面對照菌株生長速度基本同步。并且接受了太空誘變影響的太空菌株在產(chǎn)喜樹堿能力上并無明顯提高。
　　 在培養(yǎng)喜樹內(nèi)生真菌的培養(yǎng)基中添加了KH2PO4、MgSO4和(NH4)2SO4三種鹽,采用三因素三水平的正交試驗進行優(yōu)化。試驗結(jié)果表明,采用4號方案進行培養(yǎng)基的優(yōu)化效果最好,能夠得到最