Plexin-B1基因沉默及沙利度胺體外對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、目的:
　　 1. 應(yīng)用特異性siRNA沉默多發(fā)性骨髓瘤RPMI8226細(xì)胞plexin-B1基因并檢測(cè)其沉默效應(yīng)；
　　 2. 探討plexin-B1 沉默及沙利度胺體外單用或聯(lián)用對(duì)多發(fā)性骨髓瘤RPMI8226細(xì)胞凋亡的影響。
　　 方法:
　　 1. 從RPMI8226細(xì)胞中提取總RNA，利用特異性引物，RT-PCR擴(kuò)增觀察plexin-B1及其配體Sema4D的表達(dá)；
　　 2. 利用脂質(zhì)

2、體法將特異性plexin-B1siRNA轉(zhuǎn)染至RPMI8226細(xì)胞，實(shí)時(shí)定量PCR分析轉(zhuǎn)染前后plexin-B1 mRNA的表達(dá)變化；
　　 3. Plexin-B1沉默及沙利度胺體外單用或聯(lián)合作用于RPMI8226細(xì)胞后，AnnexinⅤ－PI雙染法，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況；半定量RT-PCR檢測(cè)caspase-3 mRNA表達(dá)變化。
　　 結(jié)果:
　　 1. 多發(fā)性骨髓瘤RPMI8226高表達(dá)plexin

3、-B1基因及其配體Sema4D；
　　 2. 特異性plexin-B1siRNA轉(zhuǎn)染至RPMI8226細(xì)胞可引起plexin-B1基因表達(dá)下調(diào)；
　　 3.(1)轉(zhuǎn)染特異性plexin-B1siRNA的RPMI8226細(xì)胞凋亡率明顯增加；(2)沙利度胺可誘導(dǎo)RPMI8226細(xì)胞凋亡，且在一定濃度范圍內(nèi)細(xì)胞凋亡率隨藥物濃度增大而增高；(3)特異性 plexin-B1siRNA聯(lián)合沙利度胺作用于RPMI8226細(xì)胞后，細(xì)胞凋