SRAP對不同地理種源紅松遺傳結(jié)構(gòu)的研究.pdf

1、應(yīng)用SRAP分子標(biāo)記技術(shù)對紅松24個地理種源進(jìn)行研究;首次建立了紅松SRAP-PCR反應(yīng)體系;分析了不同種源的遺傳多樣性及遺傳分化;探討了遺傳結(jié)構(gòu)與生長性狀的相關(guān)性。結(jié)果如下：
　　(1)總DNA的提取采用CTAB法，并加以改進(jìn)。改進(jìn)后從紅松針葉中所提取的總DNA得率和純度較高，能滿足PCR反應(yīng)的需要。
　　(2)首次將SRAP技術(shù)應(yīng)用于紅松中，建立了紅松最優(yōu)SRAP-PCR的反應(yīng)體系及擴(kuò)增程序。在20μL的體系中:1×Bu

2、ffer，Mg2+2.5mmol/L，dNTPs0.15mmol/L，引物0.15μmol/L，DNA40～100ng，Taq酶1.5U;共35個循環(huán);前5個循環(huán)為94℃變性1min，35℃復(fù)性1min，72℃延伸30s;后30個循環(huán)僅將復(fù)性溫度升為50℃;最后72℃延伸7min。
　　(3)9對SRAP引物對紅松24個種源共計240個樣本進(jìn)行了擴(kuò)增，共得到249條條帶，其中多態(tài)性條帶143條，多態(tài)位點(diǎn)比率(P)為55.42％，平

3、均每對引物擴(kuò)增出15.9個多態(tài)位點(diǎn)，在已發(fā)表的植物中處于較高水平。
　　(4)多態(tài)位點(diǎn)比率(P)、有效等位基因數(shù)(Ae)、Nei指數(shù)(H)和Shannon信息指數(shù)(I)反映出的24個種源遺傳多樣性水平趨于一致，均為大海林種源遺傳多樣性最高，八家子最低。經(jīng)方差分析，24個種源間遺傳多樣性水平差異不顯著。
　　(5)24個種源紅松的種源內(nèi)遺傳變異占總的遺傳變異的92.35％，種源間的占7.65％，遺傳變異主要來自種源內(nèi)部。紅松2