rhEPO對大鼠腎缺血再灌注損傷中TLR4-NF-κB通路的影響.pdf

1、目的:觀察不同時(shí)段相同劑量重組人促紅細(xì)胞生成素(rhEPO)對大鼠腎缺血再灌注損傷中TLR4/NF-κB信號通路的影響，探討TLR4/NF-κB信號通路在大鼠腎缺血再灌注損傷中所起的作用及其作用機(jī)制，分析重組人促紅細(xì)胞生成素對腎臟的保護(hù)作用及不同干預(yù)時(shí)間的效果差異及其機(jī)制。
　　方法:將70只雄性SD大鼠隨機(jī)等分為假手術(shù)組（Sham組）10只、缺血再灌注組（IR組）10只、rhEPO干預(yù)組50只。rhEPO干預(yù)組包括:缺血前6h注

2、射rhEPO組（P6組）10只、缺血前2h注射rhEPO組（P2組）10只、缺血0h注射rhEPO組（P0組）10只、缺血后2h注射rhEPO組（A2組）10只、缺血后6h注射rhEPO組（A6組）10只。假手術(shù)組單純切除右腎，分離但不夾閉左側(cè)腎動脈，不造成缺血再灌注，45min后關(guān)閉腹腔，并尾靜脈注射同等量的生理鹽水，24h后留取標(biāo)本;缺血再灌注組切除右腎，分離并夾閉左側(cè)腎動脈造成缺血再灌注，45min后關(guān)閉腹腔，24h后留取標(biāo)本;前

3、6h組（P6組）:按照模型組的方法，在切除右腎之后尾靜脈注射rhEPO2000u/kg，6h之后打開腹腔并夾閉左側(cè)腎動脈，之后同模型組;前2h組（P2組）:在切除右腎之后尾靜脈注射rhEPO2000u/kg，2小時(shí)之后夾閉左側(cè)腎動脈，之后同上;0h組（P0組）:在切除右腎并分離好左腎動脈之后，夾閉左腎動脈的同時(shí)尾靜脈注射rhEPO2000u/kg，之后同上;后2h組（A2組）:按照模型組的方法，在夾閉左側(cè)腎動脈之后的2小時(shí)由尾靜脈注射r

4、hEPO2000u/kg，之后同上;后6h組（A6組）:按照模型組的方法，在夾閉左側(cè)腎動脈之后的6小時(shí)由尾靜脈注射rhEPO2000u/kg，之后同上。
　　HE法觀察腎組織病理學(xué)形態(tài)，自動生化分析儀測定BUN、Cr水平，逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測腎組織中TLR4和NF-κBmRNA含量，免疫組織化學(xué)法檢測腎小管上皮細(xì)胞中TLR4和NF-κBp50蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:IR組較Sham組腎組織病理學(xué)明顯改變

5、，BUN、Cr水平、TLR4、NF-κBmRNA含量，TLR4蛋白（在胞漿表達(dá)）、NF-κBp50蛋白（在胞核和胞漿都表達(dá)）含量表達(dá)均增高(P＜0.05)。rhEPO干預(yù)組較IR組腎組織病理學(xué)均較輕，BUN、Cr水平、TLR4、NF-κBmRNA含量，TLR4、NF-κBp50蛋白含量表達(dá)均減少(P＜0.05)。干預(yù)組中，P6、P2組均比P0、A2、A6組腎組織病理學(xué)均較輕，BUN、Cr水平、TLR4、NF-κBmRNA含量，TLR4、