歐亞種葡萄遺傳圖譜構(gòu)建和雄性不育基因及部分性狀相關(guān)QTL的定位.pdf

1、葡萄作為歷史最悠久的果樹(shù)之一，具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。近年來(lái)我國(guó)在葡萄常規(guī)雜交育種的研究方面取得了突出的進(jìn)展，但在遺傳圖譜構(gòu)建和分子標(biāo)記輔助育種方面，明顯落后于其他經(jīng)濟(jì)作物。本研究以歐亞種葡萄‘魏可’(Vitis vinifera L.)自交后代88個(gè)單株（‘WS’群體）為作圖群體，采用SSR標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建了‘WS’分子遺傳圖譜，結(jié)合BSA法初步定位了葡萄雄性不育基因Vv Ms1，并對(duì)該區(qū)域進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。最后，對(duì)‘WS’群體的葉形多態(tài)

2、性和兩個(gè)物候期相關(guān)性狀進(jìn)行了QTL定位。主要研究成果如下:
　　1.根據(jù)NCBI和文獻(xiàn)中已報(bào)道的470對(duì)SSR引物和180對(duì)EST-SSR引物在‘魏可’和7個(gè)子代上進(jìn)行多態(tài)性篩選，共篩選到了141個(gè)SSR標(biāo)記和28個(gè)EST-SSR標(biāo)記。以‘魏可’自交后代88個(gè)單株（‘WS’群體）為作圖群體，利用篩選到的多態(tài)性引物對(duì)該群體進(jìn)行基因型分析，并使用Joinmap4.0軟件構(gòu)建了一張葡萄分子遺傳圖譜。該分子遺傳圖譜形成21個(gè)連鎖群，包含了

3、134個(gè)SSR標(biāo)記和27個(gè)EST-SSR標(biāo)記，覆蓋總圖距為1333.3cM，標(biāo)記間的平均距離為8.28cM。
　　2.為了對(duì)葡萄雄性不育基因進(jìn)行定位研究，以可育葡萄‘魏可’為親本構(gòu)建的自交群體88株為試驗(yàn)材料，運(yùn)用分離群體分組混合分析法（bulked segregant analysis，BSA）構(gòu)建可育株和不育株基因池，結(jié)合SSR技術(shù)對(duì)葡萄雄性不育基因進(jìn)行了初步的定位研究和生物信息學(xué)分析。本研究篩選到兩個(gè)與葡萄雄性不育基因連鎖的

4、SSR標(biāo)記VMD34和VVIB23，且位于該基因兩側(cè)，相距的遺傳距離分別為3.5cM和1.9cM。兩標(biāo)記間的物理距離為1134kb，在該區(qū)域共預(yù)測(cè)到了111個(gè)候選基因。該研究對(duì)葡萄雄性不育基因的精細(xì)定位及分子標(biāo)記輔助育種奠定了良好的基礎(chǔ)。
　　3.利用MapQTL5.0軟件，采用區(qū)間作圖法，對(duì)葡萄的部分?jǐn)?shù)量性狀進(jìn)行QTL定位。檢測(cè)到了27個(gè)與葡萄葉形多態(tài)性相關(guān)的QTL位點(diǎn)，依次命名為lmc-1至lmc-27，分布在LG11、LG1