扇貝裙邊糖胺聚糖對(duì)六羥基多巴胺誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、摘要目的：研究扇貝裙邊提取物一扇貝糖胺聚糖(SS—GAG)對(duì)六羥基多巴胺(6一OHDA)誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞損傷的保護(hù)作用，及其抗帕金森病(parkinson’SdiseasePD)的作用機(jī)制。方法：體外培養(yǎng)人神經(jīng)母瘤細(xì)胞株SHSY5Y，隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組(六羥基多巴胺損傷組)和實(shí)驗(yàn)組(不同濃度的SS—GAG預(yù)處理細(xì)胞后，再加入六羥基多巴胺)，采用MTT法測(cè)定細(xì)胞的存活率，Hochest33258熒光染色觀察凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化

2、，AnnexinVFITC／PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)線粒體膜電位的改變。結(jié)果：六羥基多巴胺損傷細(xì)胞后，細(xì)胞存活率顯著降低；熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞出現(xiàn)典型的凋亡形態(tài)；細(xì)胞凋亡率顯著升高；線粒體膜電位顯著下降。而用SSGAG預(yù)處理24小時(shí)后，能顯著提高細(xì)胞存活率；細(xì)胞凋亡程度明顯減弱，凋亡率有明顯下降；升高線粒體膜電位。結(jié)論：SSGAG能夠減輕六羥基多巴胺對(duì)SH—SY5Y細(xì)胞的損傷程度，且在一定濃度范圍內(nèi)呈劑量依賴效應(yīng)。關(guān)鍵詞

3、：扇貝糖胺聚糖；六羥基多巴胺；神經(jīng)母瘤細(xì)胞；帕金森病目錄弓I‘言1第一章實(shí)驗(yàn)材料411主要試劑和儀器412實(shí)驗(yàn)細(xì)胞的培養(yǎng)及分組4第二章實(shí)驗(yàn)方法621MTT法檢測(cè)SSGAG對(duì)六羥基多巴胺損傷后SHSY5Y增殖活性的影響622HOECHST33258熒光染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變623ANNEXINVFITC／PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡624流式細(xì)胞儀檢測(cè)線粒體膜電位變化725統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法7第三章實(shí)驗(yàn)結(jié)果831SSGAG對(duì)六羥基多巴